犬瘟热病毒(CDV)试剂盒荧光-PCR法

储存条件：
仅用于科研14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内**的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品特点: 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤高压。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

人L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒HumanL-Phenylalanineammonla-lyase,PAL 96T/48T 抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%)  Imazalil solution  质量规格：100μg/ml,u=2%

人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA检测试剂盒HumanNa+/H+exchanger3,NHE3 96T/48T 环草隆(标准品)  Siduron  质量规格：分析标准品

人NO犬瘟热病毒(CDV)试剂盒荧光-PCR法D样受体(NLR)ELISA检测试剂盒HumanNOD-likereceptor9,NLR 96T/48T 西玛津(标准品)  Simazine  质量规格：分析标准品

人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA检测试剂盒HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG 96T/48T 西玛津标

丙草胺(分析标准品,97.5%)  Pretilachlor  质量规格：分析标准品,97.5% 人TH糖蛋白(THP)ELISA检测试剂盒Huma-Hglycoprotein,THPELISAKit 96T/48T

丙草胺标准溶液(10μg/ml,u=2%)  Pretilachlor solution  质量规格：10μg/ml,u=2% 人T细胞急性母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)ELISA检测试剂盒Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit 96T/48T

残杀威标准溶液(10μg/ml,u=4%)  Propoxur solution  质量规格：10μg/ml,u=4% 人T细胞受体(TCR)ELISA检测试剂盒Humacellreceptor,TCRELISAKit 96T/48T
小鼠可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGF R1/sFlt1)ELISA试剂盒 ，英文名： sVEGF R1/sFlt1 ELISA Kit 3,3’-二没食子酸酯茶黄素(分析标准品,≥98.0%(HPLC))  Theaflavin 3,3′-digallate  质量规格：分析标准品,≥98.0%(HPLC)

大鼠L苯氨酸解氨酶(PAL)ELISA检测试剂盒RatL-Phenylalanineammonla-lyase,PALELISAKit 96T/48T 巴马汀氯化物一水合物(分析标准品)  Palmatine chloride hydrate  质量规格：分析标准品

人的牛血清白蛋白(BSA)试剂盒 Human bovine serum albumin,BSA ELISA kit BSA[=N,O-双(基硅基)乙酰胺](>75.0%(GC))  N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide  质量规格：>75.0%(GC)

Ratosteoclastdiffereiationfactor,ODFELISAKit大鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒规格：96T/48T "BSTFA[=N,O-双(基硅基)三氟代乙酰胺](>95.0%(GC),用于气相色谱)

  N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide  质量规格：>95.0%(GC)"

FRUORESCAMINE蛋白质浓度荧光定量试剂盒100 TMS-咪唑(=N-基硅基咪唑)(>98.0%(T))  TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)  质量规格：>98.0%(T)

Mousesmallnuclearribonucleoprotein,sNP/SmELISA试剂盒小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗体(sNP/Sm)ELISA试剂盒规格：96T/48T N,O-双(硅基)乙酰胺(>75.0%(GC))  N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide  质量规格：>75.0%(GC)

小鼠可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 ，英文名： sICAM-1 ELISA Kit N-甲基-N-硅基乙酰胺(>92.0%(GC))  N-Methyl-N-TMS-acetamide  质量规格：>92.0%(GC)

大鼠5核苷酸酶(5-)ELISA检测试剂盒Rat5-Nucleotidase,5-ELISAKit 96T/48T N-基硅基咪唑(>98.0%(T))  N-Trimethylsilylimidazole  质量规格：>98.0%(T)

人蛋白质二硫键异构酶(PDI)试剂盒 Human protein disulfide isomerase,PDI ELISA Kit N-基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))  N-Trimethylsilylacetamide  质量规格：>98.0%(GC)
人导管癌细胞;ZR-75-30 大鼠脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基 100mLHA腐植酸5克CP，98%

NFS-60 小鼠白血病细胞G-CSF依赖性2-肖基队亚本基二安 1,4-Dicmino-2-nitnobqnzqnq 2307-14-

VTN Others Mouse 小鼠 Vionectin / VTN 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-安基巴豆醋酯 Mqthyl 3-cminocrotonctq 1402-39-1

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A蛋白胨shēng huà shì jì容量：5克

SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照) (酪蛋白)

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