人胰高血糖素(GC) ELISA试剂盒操作方法

产品名称： 人胰高血糖素(GC) ELISA试剂盒操作方法
英文名称：Human Glucagon, GC Elisa Kit
产品货号：XG-H63941
规格 ：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..

人胰高血糖素(GC) ELISA试剂盒操作方法 英文名称：Human Glucagon, GC Elisa Kit  灵敏性高，高效性，原装进口抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。 48T/96T。

流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

操作步骤：
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。
2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4、配液：将30倍（48T 的20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
10、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
中国仓鼠肺细胞;V79 卵巢癌细胞，SK-OV-3细胞 WCF细胞，团头鲂尾鳍细胞盐酸洛哌丁胺(标准品)Loperamide HCl质量规格：HPLC>99%,标准品

人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF酮咯酸氨丁三醇Ketorolac Tromethamine 质量规格：>98.5%,USP,BR

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 酮咯酸氨丁三醇（标准品）Ketorolac Tromethamine 质量规格：HPLC>98%,标准品

原代内皮细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml兰索拉唑Lansoprazole 质量规格：干品含量>98%,USP32

ACE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 兰索拉唑（标准品）Lansoprazole 质量规格：HPLC>98%,标准品
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]多聚赖氨酸0.1%溶液质量规格：M.W:150,000~300,000Poly-L-lysine solution ( 0.1%)

AMY2A Others Cynomolgus 食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸四环素溶液,50 mg/ml质量规格：50 mg/ml,装Tetracycline  solution, 50 mg/ml, sterile

肺泡上皮细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)异辛醇(分析标准品,≥99.5%)质量规格：分析标准品,≥99.5%2-Ethyl-1-hexanol

LNCa细胞，前列腺癌细胞 人内膜腺癌细胞,HEC-1-B细胞 人肾皮质上皮细胞cDNAHRCEpiC cDNA2-乙基-1,3-己二醇(标准品)质量规格：分析标准品2-Ethyl-1,3-hexanediol

非洲绿猴肾细胞(SV40转化);COS-1 [COS1]甲基磺草酮(标准品)质量规格：分析标准品Mesotrione
CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)BOC-L-羟脯酸shēng huà shì jì容量：25克

U-2 OS(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albino季铵盐 336 cDOGqN(R) 464 63393-96-4

人前列腺成纤维细胞裂解物HPrFL化铯 Cesium chloride (for molecular biology... 7647-17-8 5G 核酸衍生物

HA Oth
HO-8910细胞，人卵巢癌细胞 小鼠结血管上皮样细胞,SVEC4-10细胞 肾动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)碱式碳酸锌质量规格：BRZinc carbonate basic

COLO 320DM(人结直肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2硬脂酸锌质量规格：BRZinc distearate

HNEpC Pellet 人鼻粘膜上皮细胞团块 > 1 mio.cells 人食道上皮细胞cDNAHEEpiC cDNA氢氧化锌(>98%,BR)质量规格：>98%,BRZinc hydroxide

CL-0082F9(小鼠畸胎瘤细胞)5×106cells/瓶×2化锌(>98%,BC)质量规格：>98%,BCZinc iodide

FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A (167 His) CHO细胞裂解液 (阳性对照) 羽扇豆鹼(标准品)质量规格：HPLC≥97%,标准品lupanine
人胰高血糖素(GC) ELISA试剂盒操作方法检测程序：公司产品仅用于科研，
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

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