人钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒操作方法

公司产品仅用于科研人钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒操作方法 英文名称：Human Calreticulin, CRT Elisa Kit 灵敏性高，高效性，原装进口抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。 48T/96T。

试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
优势特点：
1.高效、灵敏、特异的抗体；
2.稳定的重复性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔低透明度高的固相载体；
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型；
5.节省实验经费。 
试剂准备：
1. 使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25oC)，试剂不能直接在37oC溶解。
2. 标准品(冻干品)：每瓶标准品加入标准品稀释液1mL，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2000pg/mL。准备7个稀释标准品的EP管，每个EP管中加入150μL的标准品稀释液，如图所示依次倍比稀释成不同的梯度， 标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
3. 浓洗涤液：用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL，进行30倍稀释。
样本处理及要求：
1血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
注意事项：
1.试剂盒使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完，请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象，微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。
（加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用（洗涤液和反应终止液除外）。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要，zui好使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用，严禁在不同的液体之间混用！否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时，请按国家生物试验室**防护条列执行。
肾动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)盐酸丁卡因（标准品）Tetracaine HCl质量规格：HPLC法含量测定

BA/F3细胞，小鼠原B细胞 人浸润性导管癌旁皮肤细胞,CCD-1095Sk细胞 NeuroFectagen? 神经细胞转染试剂盒苯甲唑啉盐酸盐/盐酸妥拉唑林Tolazoline HCl质量规格：>98%,进口原装

非洲绿猴肾细胞;Vero E61酸托特罗定Tolterodine Tartrate质量规格：>98.5%,M受体(毒蕈碱型乙酰胆碱受体)拮抗剂

IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸托特罗定（标准品）Tolterodine Tartrate质量规格：含量测定

幼蚊细胞;C6/36托吡酯Topiramate质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5BR-(+)-巴氯芬盐酸盐R-(+)-Baclofen 质量规格：美国进口

IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 人细胞裂解液 (阳性对照) 倍氯米Beclomethasone质量规格：美国进口

III型胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL10-羟基华法林(非对映)10-Hydroxy Warfarin (Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口

U-87MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒构建稳定株)人脑星形胶质母细胞瘤 U-87MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS3'-羟基华法林3'-Hydroxy Warfarin质量规格：美国进口

IL5 Protein Canine 重组狗 IL5 蛋白 (His 标签)8-羟基华法林8-Hydroxy Warfarin质量规格：美国进口
SK-BR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人细胞裂解液 (阳性对照) Ammoniumdibasic枸橼酸氢二1克CP，95%

人钙网蛋白(CRT)ELISA试剂盒操作方法人胚肾细胞;293FT1-录2-肖基本 2-nitnochlorobqnzqnq

CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人细胞裂解液 (阳性对照) ACHE乙酰胆碱酯酶100克生物技术级，200 u/mg,粉末

HCC1937 人癌细胞metxANOL(NOTACCEPTABLEFORSHIPM
Ke-3细胞，肾癌(瘤株) 人内膜癌细胞,RL95-2细胞 人肠微血管内皮细胞总RNAHIMEC NA安替比林（标准品）质量规格：≥99%(GC),标准品Antipyrine

非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C安替比林质量规格：>99%,进口分包Antipyrine

FGFR1 Others Human 人 FGFR1 / CD331 人细胞裂解液 (阳性对照) 麝香草酚（标准品）质量规格：含量测定Thymol

615小鼠前胃癌瘤株;Fc荧光素钠（标准品）质量规格：含量测定Fluorescein di salt

人雪旺细胞 ( HSC) ( 5×105 )盐酸班布特罗（标准品）质量规格：含量测定Bambuterol

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