人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒操作方法

产品名称： 人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒操作方法
英文名称：Human Agouti Related Protein, AGRP Elisa Kit
产品货号：XG-H63997
规格 ：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..

人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒操作方法 英文名称：Human Agouti Related Protein, AGRP Elisa Kit  灵敏性高，高效性，原装进口抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。 48T/96T。

流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

操作步骤：
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。
2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4、配液：将30倍（48T 的20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
10、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人颅骨造骨细胞 (HCO) ( 5×105 ) NRK-52E，大鼠肾细胞 Rattus芴甲氧羰酰氯（Fmoc-Cl）Fmoc chloride质量规格：用于HPLC衍生化,≥99.0% (HPLC)

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B5氟罗里硅土(农残级)Florisil®质量规格：农残级

人小脑颗粒细胞 (HCGC)( 5×105 )合成硅酸镁吸附剂(250-125um)Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)质量规格：250-125um

Ⅱ型肺泡上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)吡氟禾草灵标准溶液(0.101mg/ml)Fluazifop-P-butyl solution质量规格：0.101mg/ml

人髓母细胞瘤细胞;D341Med 大鼠内膜上皮细胞完全培养基 100mL恶唑酮菌(标准品) Famoxadone solution质量规格：分析标准品,98.5%
人肠微血管内皮细胞(HIMEC)( 5×105 ) RSC, 大鼠雪旺细胞 RattusL-谷氨酰胺质量规格：>99%,BRL-Glutamine

单核细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)罗氟司特质量规格：含量≥99.0%(HPLC)Roflumilast

TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / OY 人细胞裂解液 (阳性对照) 左乙拉西坦质量规格：>99%,BR,USPLevetiracetam

人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16左乙拉西坦（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Levetiracetam

H293T细胞，人类胚胎肾脏表皮细胞 猫肾细胞,CRFK细胞 CL-0267CNE-2Z(人鼻咽癌细胞)5×106cells/瓶×2盐酸林可霉素质量规格：>850mcg/mg,BRLincomycin HCl
人上皮细胞完全培养基 100mL表告依春（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Epigoitrin

TE671 subline No.2细胞，人横纹肌肉瘤细胞 化脓性链球菌 转PYTL基因小鼠支持细胞;15P-1表没食子儿茶素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品(−)-Epigallocatechin/EGC

CCL4 Protein Human 重组人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 标签)表小檗碱（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Epiberberine

LS-17
IGFBP5 Others Cynomolgus 食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 人细胞裂解液 (阳性对照) 间甲基红质量规格：指示剂m-Methyl red

人脂肪间充质干细胞HMSC-ad紫脲酸铵(IND)质量规格：INDMurexide

SK-MES-1细胞，人肺癌细胞 人膀胱鳞癌细胞,ScaBER细胞 人前脂肪细胞-皮下HPA-s卡立普多质量规格：>99%,USP,BRCarisoprodol

水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)卡立普多（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Carisoprodol

MICB Others Human 人 MICB 人细胞裂解液 (阳性对照) 卡维地洛质量规格：> 99%,EPCarvedilol
 人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒操作方法检测程序：公司产品仅用于科研，
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

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