小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒操作方法 英文名称：Mouse osteonectin, ON Elisa Kit 灵敏性高，高效性，原装进口抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。 48T/96T。
产品名称： 小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒操作方法
英文名称：Mouse osteonectin, ON Elisa Kit
产品货号：XG-M64101
规格 ：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本.. 公司产品仅用于科研
流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
备试剂与收集血样：
1. 收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反复冻融。
2. 标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4. 洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
HFL-I细胞，人胚肺成纤维细胞 鼠肌原细胞,C2C12细胞 T-105BIII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL盐酸氟西汀（标准品）Fluoxetine 质量规格：HPLC>98%,标准品
SK-N-SH(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2马来酸氟伏沙明Fluvoxamine
maleate质量规格：>98.5%,BP2007
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纤维细胞Many types of
cells包装：5 × 105方(1ml)马来酸氟伏沙明（标准品）Fluvoxamine
maleate质量规格：HPLC>98%,标准品
原代表皮角化细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml福美斯坦Formestane质量规格：>99%
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO细胞裂解液 (阳性对照) 福美斯坦(标准品)Formestane质量规格：HPLC≥98.0%,标准品
非洲绿猴肾细胞;GL-37脱水长春花碱二硫酸盐Anhydro
Vinblastine Disulfate Salt质量规格：美国进口
CN3 Others Rat 大鼠 Coactin 3 / CN3 人细胞裂解液 (阳性对照) 替莫唑胺-d3Temozolomide-d3质量规格：美国进口
人肺泡上皮细胞完全培养基 100mL(S)赖诺普利-d5(S) Lisinopril-d5质量规格：美国进口
M14细胞，人色素瘤细胞 枯草芽孢杆菌色变种 人肺癌细胞;A-427 [A427](R)-赖诺普利钠盐(R)-Lisinopril Salt质量规格：美国进口
ANGPT4 Protein Human 重组人 Angiopoietin 4 / ANG4 /
ANGPT4 蛋白 (His 标签)赖诺普利环己基类似物Lisinopril
Cyclohexyl Analog质量规格：美国进口
人胚胎肠粘膜组织来源细胞;CCC-HIE-2液体生物防腐剂，英文名或英文缩写：Proclin 300，级别：AR，99%，规格：25克
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 碳醋铋;减式碳醋铋;碳醋氧铋;碳醋铋 BisMuth
subccronctq;BisMuth(III) ccronctq bcsic;BisMuth oxyccronctq 289-10-4
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-磺酸，英文
IL1RAPL1 Others Human 人 IL-1R8 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸伐昔洛韦水合物质量规格：美国进口Valacyclovir hydrate
A-375 [A375], 人恶性素瘤细胞株17-酮基维库溴铵质量规格：美国进口17-Keto
Vecuronium Bromide
NINJ1 Others Rat 大鼠 Ninjurin-1 / NINJ1 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-去乙酰基维库溴铵质量规格：美国进口3-Desacetyl Vecuronium
大鼠脑静脉血管平滑肌细胞完全培养基 100mL玉米素核苷同分质量规格：美国进口Zeatin riboside mixed
Isomers
B95-8绒猴EBV转化的白细胞 B95-8 EBV conversion of
leukocyte marmoset RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS盐酸多沙普仑质量规格：美国进口Doxapram
小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒操作方法操作步骤：
1、标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。
2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液：将30倍（48T 的20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
10、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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