小鼠肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒操作方法 英文名称：Mouse CA724 Elisa Kit 灵敏性高，高效性，原装进口抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。 48T/96T。
产品名称： 小鼠肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒操作方法
英文名称：Mouse CA724 Elisa Kit
产品货号：XG-M64129
规格 ：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本.. 公司产品仅用于科研
流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
备试剂与收集血样：
1. 收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反复冻融。
2. 标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4. 洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
Eca-109细胞，人食管癌细胞 人脑瘤细胞,SF126细胞 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO Hu 164 SCF
17无蛋白酶牛血清白蛋白Albumin, from
bovine Protease free质量规格：>98%,分子生物学级
CA46(人Butts瘤细胞) 5×106cells/瓶×2硬脂酸铝Aluminum stearate质量规格：AR
CD84 Others Human 人 CD84 人细胞裂解液 (阳性对照) 铋试剂III(>99%,BR)Bismuth(III)
nitrate pentahydrate质量规格：>99%,BR
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B41酸氢钙二水(>98%,BR)Calcium
phosphate, dibasic, dihydrate质量规格：>98%,BR
CSF3R Others Human 人 G-CSFR / CD114 人细胞裂解液 (阳性对照) 碳酸铈Cerium(III)
carbonate, hydrate质量规格：>99.9%,AR
人低分化肺腺癌细胞;SK-LU-1 大鼠脑静脉血管内皮细胞完全培养基 100mL2'-脱氧肌酐-5'-1酸钠(>98%,BR)2'-Deoxyinosine-5'-monophosphate salt质量规格：>98%,BR
MMQ 小鼠垂体瘤细胞邻乙氧基苯(>98%,BR)2-Ethoxybenzaldehyde质量规格：>98%,BR
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-硝基芴(>99.0%(HPLC))2-Nitrofluorene质量规格：>99.0%(HPLC)
色素细胞生长添加物(不含TPA)MelGS-29,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC))9,9'-Spirobi[9H-fluorene]质量规格：>98.0%(HPLC)
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))2-Aminoanthracene质量规格：>98.0%(GC)(T)
MM, 小鼠小胶质细胞 Mouse鲁米诺100毫克
RK1 Others Human 人 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,4-二安基-6-本基-1，3，5-三嗪 2,4-Dicmino-6-phqnyl-1,3,5-triczinq 91-76-9
人胚肺细胞系;KuMA重组蛋白A琼脂糖凝胶FF1克
大鼠神经皮质细胞(RNc)(1×106)丽春红2Rshēng huà shì jì容量：2～8°C100克
CM-H023人甲状腺滤泡上皮细胞完全培养基100mL41288-96-42-录-
NCI-H524 人小细胞肺癌新橙皮苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Neohesperidin
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞新穿心莲内酯（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Neoandrographolide
人骨髓间充质干细胞(hMSCs)新芒果苷(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Neomangiferin
人肺成纤维细胞;HFL1 人成纤维细胞完全培养基 100mL熊果苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Arbutin
293来源病毒包装细胞;ΦA辛辣内酯A（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Pungiolide A
小鼠肿瘤标志物(CA724)ELISA试剂盒操作方法操作步骤：
1、标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。
2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液：将30倍（48T 的20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
10、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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