大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒操作方法

产品名称： 大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒操作方法
英文名称：Rat Nuclear factor-kappa B, NF-κB Elisa Kit
产品货号：XG-R64241
规格 ：48T/96T
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
试剂盒种属：马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..

大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒操作方法 英文名称：Rat Nuclear factor-kappa B, NF-κB Elisa Kit  灵敏性高，高效性，原装进口抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。 48T/96T。

流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）

操作步骤：
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，依次进行稀释数倍。
2、加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品*终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4、配液：将30倍（48T 的20 倍）浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7、温育：操作同3。
8、洗涤：操作同5。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
10、显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.
11、终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
12、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
1075240-43-5  Omadacycline tosylate  5mg  Merkel Cell Polyomavirus(MCPyV)梅克尔多元癌细胞病毒LAMP试剂盒  动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒  50次  低温  负20度

107534-93-0  Macelignan ((+)-Anwulignan)  10mg  Feline Herpes Virus猫庖疹病毒LAMP试剂盒  动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒  50次  低温  负20度

107534-93-0  Macelignan ((+)-Anwulignan)  10mM*1mLinDMSO  Gallibacterium anatis鸭源鸡杆菌LAMP试剂盒  动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒  50次  低温  负20度

107534-93-0  Macelignan ((+)-Anwulignan)  5mg  Gallibacterium anatis鸭源鸡杆菌LAMP试剂盒  动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒  50次  低温  负20度

107534-96-3  Tebuconazole  10mM*1mLinDMSO  Feline Immunodeficiency Virus(FIV)猫缺陷病毒RT-LAMP试剂盒  动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒  50次  低温  负20度
MCF7B细胞，人癌细胞 人癌Tamoxifen耐药株,LCC2细胞 脂肪细胞生长添加物PAGS脱氢硝苯地平Dehydro Nifedipine质量规格：美国进口

水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4脱氢硝苯地平-d6Dehydro Nifedipine-d6质量规格：美国进口

IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人细胞裂解液 (阳性对照) 7-苄氧基-N-des{[2-(2-羟基)乙氧基]乙基} 喹硫平7-Benzyloxy-N-des{[2-(2-hydroxy)ethoxy]ethyl} Quetiapine质量规格：美国进口

卵巢上皮细胞培养基OEpiCM-prf喹硫平quetiapine质量规格：美国进口

KIRREL3 Others Mouse 小鼠 KIRREL3 人细胞裂解液 (阳性对照) 7-羟基喹硫平7-Hydroxy Quetiapine质量规格：美国进口
人脐静脉内皮细胞;HUV-EC-C邻硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量：100克

CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1

草鱼肾细胞;GIK锌shēng huà shì jì容量：RT5克

T24细胞，膀胱移行细胞癌细胞 高分化鳞癌细胞,HCC细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY0908碱式碳酸锌shēng huà shì
SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-羟基-4-甲氧基肉桂酸质量规格：美国进口3-Hydroxy-4-methoxycinnamic Acid

CL-0047C6(大鼠胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2吡嗪酰胺-d3质量规格：美国进口Pyrazinamide-d3

CSAG1 Others Human 人 CSAGE / CSAG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 地美环素质量规格：美国进口Demeclocycline

小鼠肠微血管细胞完全培养基 100mL盐酸地美环素半水化合物质量规格：美国进口Demeclocyclin  hemihydrate

293LVT人胚肾细胞--用于慢病毒包装 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine乙基2-(6-氨基-2,3-二氯苄)甘氨酸(阿那格雷杂质A)质量规格：美国进口Ethyl 2-(6-Amino-2,3-dichlorobenzyl)glycine(Anagrelide Impurity A)
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒操作方法检测程序：公司产品仅用于科研，
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

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