商品介绍:
测定意义:
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
正常情况下,细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态,细胞内活性氧(ROS)水平维持在较低的生理范围;在病理情况下,细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破,细胞内活性氧水平过多,就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸,使机体出现氧化应激,同时,活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤,导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。
因此,通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。
测定原理:
荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜,在线粒体内被酯酶水解,形成无荧光的DCFH,DCFH迅速与ROS反应**荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。
需自备的仪器和用品:
多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。
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产品属性:
产品名称
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规格
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检测方法
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货号
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线粒体活性氧产生速率(ROS)比色法检测试剂盒100管/96样
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100管/96样
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荧光法
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XG0181151-100管/96样
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注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
操作流程:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
天冬酰胺內肽酶(LGMN)elisa试剂盒英文名称:LGMN ELISA Kit软骨衍生形态发生蛋白1抗体包装5g
天冬酰胺合成酶(ASNS)elisa试剂盒英文名称:ASNS ELISA Kitβ-酪蛋白抗体包装100g
天冬氨酸转氨酶2(AST2)elisa试剂盒英文名称:AST2 ELISA Kit21号染色体开放阅读框63抗体包装25g
天冬氨酸转氨酶(AST)elisa试剂盒英文名称:AST ELISA Kit4号染色体开放阅读框52抗体包装1g
套膜蛋白(iNV)elisa试剂盒英文名称:iNV ELISA Kit4号染色体开放阅读框40抗体包装5g
糖原磷酸化酶M(PYGM)elisa试剂盒英文名称:PYGM ELISA KitCullin3抗体包装1g
糖原磷酸化酶L(PYGL)elisa试剂盒英文名称:PYGL ELISA Kit分裂周期同源蛋白40抗体包装5g
糖原磷酸化酶B(PYGB)elisa试剂盒英文名称:PYGB ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白106抗体包装100g
糖原合酶激酶3α(GSK3α)elisa试剂盒英文名称:GSK3α ELISA Kit染色质修饰蛋白1A抗体包装25g
糖皮质受体β(GRβ)elisa试剂盒英文名称:GRβ ELISA Kit叶绿体伴侣蛋白抗体(苹果)包装100g
糖皮质受体α(GRα)elisa试剂盒英文名称:GRα ELISA Kit分裂周期蛋白20B抗体包装25g
糖抗原125(CA125)elisa试剂盒英文名称:CA125 ELISA Kit周期调控蛋白D1抗体包装100ml
碳酸酐酶Ⅸ(CA9)elisa试剂盒英文名称:CA9 ELISA Kit周期蛋白B1结合蛋白1抗体包装25ml
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)elisa试剂盒英文名称:CA2 ELISA Kit周期调控因子14A抗体包装500ml
碳酸酐酶Ⅰ(CA1)elisa试剂盒英文名称:CA1 ELISA Kit第七号染色体开放阅读框12抗体包装1g
胶红酵母Rhodotorula│mucilaginosa 质量规格:效价测定组蛋白H2b试剂盒泽泻A-24-醋酸酯;Alisol A
白鳞蘑菇Agaricus│bernardii Quél. 质量规格:>750ug /mg,USP,培养级组试剂盒棕榈酸酯;Methyl hexadec
深海海旋菌Thalassospira│profundimaris 质量规格:含量测定足标记蛋白/足盂蛋白试剂盒千金藤啶碱;L-Stepholidi
线粒体活性氧产生速率(ROS)比色法检测试剂盒100管/96样GTPase activating protein, GAP 吉莫斯特;吉美嘧啶(标准品)Human/人Elisa试剂盒规格:48T
GTPase activating protein, GAP 吉莫斯特;吉美嘧啶Human/人Elisa试剂盒规格:96T
Apolipoprotein H, apo-H 蝙蝠葛诺林碱(标准品)Human/人Elisa试剂盒规格:48T
Apolipoprotein H, apo-H 氯化木兰花碱Human/人Elisa试剂盒规格:96T
glycophosphatidylinositol, GPI 木兰花碱Human/人Elisa试剂盒规格:48T
glycophosphatidylinositol, GPI 碘化木兰花碱Human/人Elisa试剂盒规格:96T
pokeweed mitogen, PWM 去甲乌药碱盐酸盐(标准品)Human/人Elisa试剂盒规格:48T
pokeweed mitogen, PWM 去甲乌药碱盐酸盐Human/人Elisa试剂盒规格:96T
Lipopolysaccharides, LPS 二氢欧山芹素 (标准品)Human/人Elisa试剂盒规格:48T
Lipopolysaccharides, LPS 异泽兰黄素(标准品)Human/人Elisa试剂盒规格:96T
preptin 利莫那班羧酸Human/人Elisa试剂盒规格:48T
preptin 玉米黄质Human/人Elisa试剂盒规格:96T
peroxisome proliferators activator receptors alpha, PPAR-α 三亚乙基硫代磷酰胺Human/人Elisa试剂盒规格:48T
peroxisome proliferators activator receptors alpha, PPAR-α 普拉克索碱Human/人Elisa试剂盒规格:96T
Apolipoprotein E, Apo-E 普拉克索碱(标准品)Human/人Elisa试剂盒规格:48T
Apolipoprotein E, Apo-E 染料木素/金雀异黄酮Human/人Elisa试剂盒规格:96T
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