蛹虫草培养

培养及打管说明：

1、安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。

2、菌株恢复培养：用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于1-2支建议的培养基试管中，并在建议的条件下培养。

3、注意事项：菌种活化前，请将安瓿管保存在6-10℃的环境下，某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需要连续两次继代培养才能正常生长

4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。

5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。 

保藏方法：

1. 传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧**用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2. 液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3. 载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5. 冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷冻干燥保藏法产品仅用于科研

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。

粉状毕赤酵母  生产的单细胞蛋白

埃切毕赤酵母  产色酸、尿酸酶

假丝酵母  模式菌株。测定康唑，降低羟基苯，降解产生（S）-1,3-丁二醇脱氢酶，产脂肪酶，质量控制菌株

酿酒酵母  酿造酒精(南阳混合酵母)

成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

CGA Others Human  FSH alpha / TSH alpha / CGA 细胞裂解液 (阳性对照)

叙利亚仓鼠皮肤细胞;GH-S1

APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0 癌细胞，MDA-MB-453细胞 GIK细胞，草鱼肾细胞系

皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1

HA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 细胞裂解液 (阳性对照)

猪伪狂犬病毒（gE基因）PCR检测试剂盒/Prilocaine 17861盐酸丙胺卡因

猪伪狂犬病毒实时荧光PCR检测试剂盒Prerubialatin16677189

猪伪狂犬病毒（gE基因）实时荧光PCR检测试剂盒Pregnenolone1453孕烯醇酮

猪繁殖与呼吸综合征病毒通用型RT-PCR检测试剂盒/Pregn-eneβ,17α,S-triol37

猪繁殖与呼吸综合征病毒（Nsp2 1594~16变异株）RT-PCR检测试剂盒/Pregabalin14855普瑞巴林

人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE/ELA2)酶联吸附测定试剂盒 别称:ELANE, ELA2, GE, HLE, HNE, NE, PMN-E, SCN1, elastase, neutrophil expressed Human NE/ELA2(Neutrophil Elastase/Elastase-2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组NE/ELA2浓度

使用说明书：

复苏菌种前需先准备好适用于该菌生长的固体、液体培养基和培养设备，以形成无菌的操作环境。

开启之前，先用75%酒精棉试管表面，按铝盖上的箭头方向打开瓶盖和胶塞，加入0.3ml左右的配套液体培养基，用无菌滴管反复吹吸，将冻干菌种溶解为悬液，然后用无菌滴管或接种环移至斜面、平板或液体培养基，并连同剩余菌悬液的试管一起放置于36℃培养箱中进行培养。

次日观察菌种的生长情况，如未生长，应继续培养24h，或吸取培养之后的试管剩余菌悬液再次接种培养，培养24小时观察。

菌株为一次性使用品，暂不开启的菌种应在4℃环境下保存。

复苏后的菌种在传1-2代以后使用，建议菌种使用5代后弃用。

综合微生物的培养方法，包括以下步骤：

前期准备：（A）处理；（B）制备Biolite水；（C）检查设备和材料；

按比例配制培养材料；

导入曝气，进行繁殖培养；

取液观察；（a）取液；（b）稀释菌液；（c）平板培养；

蛹虫草培养分离并检测；

（6）取液储存；通过该综合微生物培养方法简单可操作性强，培养的综合微生物均在3代以内，菌类稳定不发生突变，且繁殖快速。

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