蓝色犁头霉保存

仪器设备与器具：

1 恒温培养箱：36±1℃。

2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。

3 接种针。

4 显微镜。

5 超净工作台。

6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。

7 天平：感量0.01g。

8 釜。

9 培养皿（直径为90mm）、试管，经121℃、30分钟。

10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片

产品名称：蓝色犁头霉保存

拉丁文: Absidia│coerulea

分离基物: 土壤

提供形式: 冻干物

**等级: 1

模式菌株: no

培养基: 0014

生长条件: 26-28℃

存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。

脱水存法：

①沙土保存法，能产孢子、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。

② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。

③ 石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。

菌种的使用范围:

（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，酿酒酵母菌组成成分，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。 

（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

微生物菌种的培养：

     ⒈ 孢子制备

     ⑴ 孢子的制备

     一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

     ⑵ 霉菌孢子的制备

     霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

     ⒉ 种子制备

     ⑴ 摇瓶种子制备

     摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

     ⑵ 种子罐种子制备

     蓝色犁头霉保存种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为种子，把子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

蘑菇假单胞菌  蘑菇黑腐病病原菌

产碱假单胞菌  模式菌株

橙色粘球菌

黄色粘球菌

猪小肠上皮细胞;ZYM-DIEC02

CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 细胞裂解液 (阳性对照)

肾癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml

BS-C-1细胞，非洲绿猴肾细胞 导管瘤细胞,UACC812细胞 脑膜细胞裂解物HMCL

猴肾细胞;Vero IgCD4

IL12B Others Human  IL12B / P40 细胞裂解液 (阳性对照)

猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲型经典株与高致病性变异株双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒Ponasterone A1386坡那甾酮A

猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲株与美洲株双重实时荧光RT-PCR检测试剂盒Polypodine B1694水龙骨甾酮B

猪繁殖与呼吸综合征（类NADC0毒株） 实时荧光RT-PCR检测试剂盒Polypodine B ,22-acetonide1598585,22-异丙叉基水龙骨甾酮B

猪细小病毒PCR检测试剂盒/Polyphyllin D7731重楼皂苷D

猪细小病毒实时荧光PCR检测试剂盒Polyhydroxybutyrate267444聚羟基丁酸酯

人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶联吸附测定试剂盒 别称:CCL4, ACT2, AT744.1, G-26, HC21, LAG-1, LAG1, MIP-1-beta, MIP1B, MIP1B1, SCYA2, SCYA4 Human MIP-1β(Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组MIP-1β浓度