产品名称:海神弧菌培养
拉丁文: Vibrio│neptunius
分离基物: 三疣梭子蟹
提供形式: 冻干物
**等级: 1
模式菌株: no
培养基: 223
生长条件: 30℃
存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
仪器设备与器具:
1 恒温培养箱:36±1℃。
2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。
3 接种针。
4 显微镜。
5 超净工作台。
6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。
7 天平:感量0.01g。
8 釜。
9 培养皿(直径为90mm)、试管,经121℃、30分钟。
10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片
①简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月;②液氮超低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。
脱水存法:
①沙土保存法,能产孢子、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;2~3次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌蒸馏水2~2.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,于4℃冰箱保存,保存期可达5~7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂(一般用脱脂牛奶或血清)相混合,放在安瓿管内于-20~-30℃的乙醇浴中速冻。然后,在低温下用真空泵抽干,并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻,熔封安瓿管,于低温下保存。保存期可达5~10年之久。
③ 石蜡油封存法,在斜面菌种培养物上,倒上后的石蜡油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。
菌种的使用范围:
(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,酿酒酵母菌组成成分,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。
(2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。
(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
海神弧菌培养 种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为种子,把子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
地衣形芽孢杆菌 杆菌肽A产生菌 地衣形芽孢杆菌 产杆菌肽A 蜡状芽孢杆菌蕈状变种 蜡状芽孢杆菌 麻脱胶 小鼠小胶质细胞MM FAM19A2 Others Human FAM19A2 细胞裂解液 (阳性对照) 大鼠甲状腺上皮细胞完全培养基 100mL AML-12小鼠正常肝细胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 标签) SMC-1(胸膜瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 胃黏膜上皮Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) 黄曲霉B1亲和柱25根/盒,3mlHydrocortisone3氢化可的松 黄曲霉B1亲和柱25根/盒,1mlHorminone2188717α-羟基罗列酮 呕吐亲和柱25根/盒,3mlHomopiperazine56高哌嗪 呕吐亲和柱25根/盒,1mlHerbarin363797 玉米赤霉烯酮亲和柱25根/盒,3mlHerbaridine B11515115 人白细胞分化抗原8(CD8)酶联吸附测定试剂盒 别称:CD8 Human CD8(Cluster of Differentiation 8) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CD8浓度
地衣形芽孢杆菌 杆菌肽A产生菌
地衣形芽孢杆菌 产杆菌肽A
蜡状芽孢杆菌蕈状变种
蜡状芽孢杆菌 麻脱胶
小鼠小胶质细胞MM
FAM19A2 Others Human FAM19A2 细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠甲状腺上皮细胞完全培养基 100mL
AML-12小鼠正常肝细胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS
EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 标签)
SMC-1(胸膜瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 胃黏膜上皮Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
黄曲霉B1亲和柱25根/盒,3mlHydrocortisone3氢化可的松
黄曲霉B1亲和柱25根/盒,1mlHorminone2188717α-羟基罗列酮
呕吐亲和柱25根/盒,3mlHomopiperazine56高哌嗪
呕吐亲和柱25根/盒,1mlHerbarin363797
玉米赤霉烯酮亲和柱25根/盒,3mlHerbaridine B11515115
人白细胞分化抗原8(CD8)酶联吸附测定试剂盒 别称:CD8 Human CD8(Cluster of Differentiation 8) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组CD8浓度