鹰嘴豆中间根瘤菌保存

产品名称：鹰嘴豆中间根瘤菌保存

拉丁文: Mesorhizobium ciceri

提供形式: 冻干物

**等级: 1

模式菌株: yes

应用领域: 模式菌株

培养基: 根瘤菌培养基：酵母提取物 1.0 g，甘露醇 10.0 g，土壤提取液 200 ml，琼脂 15.0 g，蒸馏水 800 ml，pH 7.2，土壤提取液：土壤50克，加水200ml 121℃蒸煮1小时，过滤后加水补足到200ml。

生长条件: 28℃，好氧

存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法

仪器设备与器具：

1 恒温培养箱：36±1℃。

2 1000ml三角烧瓶、1ml、10ml移液管。

3 接种针。

4 显微镜。

5 超净工作台。

6 玻片、酒精灯、洗耳球、试管架。

7 天平：感量0.01g。

8 釜。

9 培养皿（直径为90mm）、试管，经121℃、30分钟。

10试管夹、酒精灯、秒表、载玻片

①简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。

脱水存法：

①沙土保存法，能产孢子、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。

② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。

③ 石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。

菌种的使用范围:

（1）合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，酿酒酵母菌组成成分，重复性强，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏（Czapek）培养基等。 

（2）天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，培养效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

微生物菌种的培养：

     ⒈ 孢子制备

     ⑴ 孢子的制备

     一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

     ⑵ 霉菌孢子的制备

     霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

     ⒉ 种子制备

     ⑴ 摇瓶种子制备

     摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

     ⑵ 种子罐种子制备

    鹰嘴豆中间根瘤菌保存 种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为种子，把子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

人信号素4D(SEMA4D)酶联吸附测定试剂盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit                    3,3-Dimethylacrylic acid  中文名：千里光酸  分子式：C5H8O2 

人心肌锚蛋白重复域1elisa试剂盒   人心肌锚蛋白重复域1试剂盒   规格型号：96T/48T   人心肌锚蛋白重复域1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人心肌锚蛋白重复域1试剂盒、人心肌锚蛋白重复域1 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     3-(Boc-Amino)piperidine  中文名：  分子式：C10H20N2O2 

人相关抗原(TAA)ELISA试剂盒     2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名：  分子式：C19H16FNO  度：98.0%

人腺苷三0酸结合盒转运体G1(ABCG1)酶联吸附测定试剂盒   Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名：  分子式：C19H20N4  度：98.0%

人腺苷三0酸结合盒转运体A1(ABCA1)酶联吸附测定试剂盒   Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit                 2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名：  分子式：C19H20N4

Benzoyl-DL-mine  4703-38-2  中文名：苯甲酰基-DL-蛋氨酸  分子式：C12H15NO3S    二氢二醇脱氢酶   英文名称：   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   DDH2

Bindone  1707-95-5  中文名：双茚二酮  分子式：C18H10O3    多巴胺   英文名称：   Human Dopamine   规格：   48T/96T   英文缩写：   DPN

Benzyl carbazate  5331-43-1  中文名：肼基甲酸苄酯  分子式：C8H10N2O2    强啡肽   英文名称：   Human Dynorphin   规格：   48T/96T   英文缩写：   DYN

5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3    鼠疫杆菌(YP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

7-Benzyloxyindole  20289-27-4  中文名：7-苄氧基吲哚  分子式：C15H13NO    鼠疫杆菌(YP)核酸检测试剂盒   48T

人Ⅱ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)酶联吸附测定试剂盒 别称:PⅡCP Human PⅡCP(Procollagen Ⅱ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组PⅡCP浓度

人白介素1α(IL-1α)酶联吸附测定试剂盒 别称:IL1A, IL1-A, IL1, IL1F1, Preinterleukin 1 Alpha, Hematopoietin-1, Pro-Interleukin-1-Alpha Human IL-1α(Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-1α浓度