抗体的鉴定:产品仅用于科研
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
人硒蛋白P(SEPP1)酶联吸附测定试剂盒 别称:SELP, SeP Human SEPP1(Selenoprotein P) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组SEPP1浓度
产品名称
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规格
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货号
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上海Anti-phospho-Smad2 (Ser465)西格抗体
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0.1ml/100μg
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XG-01K88029
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英文名称 Anti-phospho-Smad2 (Ser465)
中文名称 磷酸化Smad2抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 学 信号转导 细胞凋亡 转录调节因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量 predicted molecular weight: 58kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthetic phosphopeptide derived from human Smad2 around the Ser465
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:500-5000 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
别 名 phospho-Smad2(Ser465); p-Smad2(Ser465); phospho-Smad2(S465); Mothers against decapentaplegic homolog 2; SMAD 2; Mothers against DPP homolog 2; Smad2; hMAD 2; hSMAD2; JV18 1; JV18; JV181; MAD; MAD Related Protein 2; MADH2; MADR2; MGC22139; MGC34440; Mothers Against Decapentaplegic Homolog 2; mothers against DPP homolog 2; SMAD 2; SMAD; SMAD2; SMAD2_HUMAN.
稀释方法:
方法1. 实验前,将冻干粉抗体用无菌蒸馏水稀释(或PBS稀释),将稀释后的抗体分装5-10支(20ulx5支或10ulx10支),放入-20℃保存,用一支拿一支,避免反复冻溶。
方法2. 实验前,也可将冻干粉抗体用无菌蒸馏水稀释50ul(或PBS稀释50ul)成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存,用多少吸多少。
方法3. 预试验可做几个梯度1:100、200、400背景高还可做上去,选一个好的稀释比例,再正式做,工作液的稀释-使用抗体稀释液。
石蜡切片和冰冻切片的比较
(1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原 性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。
(2)冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原活性,做化 时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写着两者都可,那就都能做。
(3)石蜡切片的优点可以保持组织细胞的形态结构,且容易存放在室温,而冰冻切片比较麻烦,一定要存在-80度的低温冰箱中,尤其是用来做原位杂交 的的切片,为了防止RNA降解,保存一贯很重要。由于石蜡切片可以切到4微米左右,所以原位杂交探针容易渗透到组织中去,容易成功,而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。
实验要点:
1.产品名称如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L硼酸缓冲液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选适条件;
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及苯酚基,也可与糖基共价结合;
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
碳酸钡(>99%,BR) Barium carbonate 质量规格:>99%,BR Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISA试剂盒人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
苯甲酰胺(>98%,BR) Benzamide 质量规格:>98%,BR /酵母细胞总RNA分离试剂盒20
比布里希猩红(>90%,BS) Biebrich scarlet 质量规格:>90%,BS MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit小鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒规格:96T/48T
柠檬酸钙;柠檬酸钙四水 Calcium , tetrahydrate 质量规格:>98%,BR 小鼠凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒 ,英文名: TAT ELISA Kit
硫酸铯(分子生物学级) Cesium sulfate 质量规格:>99.5%,分子生物学级 人内皮脂肪酶(EL)ELISA检测试剂盒HumanEndotheliallipase,ELELISAKit 96T/48T
铜片 Copper sheet 质量规格:>99.5%,厚度0.1-0.2cm 大鼠游离脂肪酸(FFA)试剂盒 Rat free fatty acids,FFA ELISA Kit
氯化亚铜(>97%,BR) Copper(I) chloride 质量规格:>97%,BR 英文名称HumanCINC-1ELISAKit人CINC-1规格:96T/48T
化亚铜(>99%,BR) Copper (I) iodide 质量规格:>99%,BR 多肽合成1样本
2'-脱氧鸟苷5'二二钠盐 dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate di salt 质量规格:>97%,分子生物学级 ELISAKitGHRP山羊生长释放多肽规格:48T/96T
D-葡萄糖醛酸钠(> 98%,BR) D-Glucuronic acid, salt, monohydrate 质量规格:> 98%,BR 小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒 ,英文名: GS ELISA Kit
Perfluorododecanoic acid TCA-methylester - 纯品型,50mg 特征形态 固态
1h,1h,2h,2h-全氟-1-癸醇 标准品 Physcion 678-39-7 纯品型,100mg 特征形态 固态
Perfluorodecanoic acid标准品 N-Phenylthiourea - 纯品型,100mg 特征形态 固态
上海Anti-phospho-Smad2 (Ser465)西格抗体Cabozantinib 中文名:卡博替尼 分子式:C28H24FN3O5 度:98.0% 小鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒
Afatinib 中文名:阿法替尼 分子式:C24H25ClFN5O3 度:98.0% 小鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)ELISA试剂盒
9-Hydroxy-4-androstene-3,17-dione 中文名:9-羟基-4-雄甾烯-3,17-二酮 分子式:C19H26O3 度:98.0% 小鼠蛋白激酶A
应用于IHC、WB、 IF、IP、ELISA等实验,质量保证,无效免费退换,另外本公司长期供应化抗体、WB抗体、化试剂盒和抗体试验所需全部相关试剂、荧光标记抗体、elisa抗体、单克隆抗体、多克隆抗体、各种标记的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研实验抗体。
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