操作步骤：
步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存
方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。
细胞特性
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产品名称
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HEPA1-6小鼠肝癌细胞
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英文名称
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HEPA1-6:HEPA16
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分类
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小鼠细胞系
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货号
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XG-X3640
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组织来源
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肝脏
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形态
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上皮细胞样
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细胞别称：hepa 1-6; Hepa1-6；小鼠肝癌细胞
种属来源：小鼠
年龄性别：
组织来源：肝脏
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
背景简介：Hepa 1-6细胞是C57/L小鼠中产生的BW7756小鼠肝癌的衍生株。检测表明鼠痘病毒（ectromelia virus，ECTV）阴性
生物等级：1
细胞规格：1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测：无
基因表达情况：albumin, alpha fetoprotein
(AFP, alpha-fetoprotein); albumin; alpha 1 antitrypsin (alpha-1-antitrypsin);
amylase
保藏机构：ATCC; CRL-1830 BCRC; 60051
DSMZ; ACC-175 ECACC; 92110305
培养基：90%DMEM+10%FBS
培养条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
倍增时间：~24-30小时
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
一．培养基及培养冻存条件准备
1） 准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
细胞处理
1） 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品：
锌指蛋白350/乳腺癌易感基因1结合蛋白抗体 ZNF350
锌指蛋白737抗体 ZNF737
补体C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白5抗体 CTRP5
成纤维细胞激活蛋白α重组兔单克隆抗体 FAP
DNA聚合酶δ催化亚单位/DNA pol δ cat抗体 DNA Polymerase delta, catalytic subunit
EDEM3蛋白抗体 EDEM3
磷酸化后期促进复合蛋白3抗体 phospho-CDC27 (Thr244)
磷酸化上皮钠通道β2抗体 phospho-SCNN1B (Thr615)
自噬相关蛋白4C抗体 ATG4C
组织蛋白酶H轻连抗体 Cathepsin H light chain
核纤层蛋白B重组兔单克隆抗体 Lamin B1
互养蛋白3抗体 SNTB2/Syntrophin-3
P5C还原酶1抗体 PYCR1
PE-Cy7标记人CD2单克隆抗体 human CD2/PE-Cy7
神经调节蛋白2抗体 NRG2
视网膜前神经折叠源框蛋白抗体 RAXL1
冰冻切片组织K（CATHEPSIN
K）活性原位荧光染色检测试剂盒
HEPA1-6小鼠肝癌细胞鸡补体3裂解产物(C3SP)elisa分析检测试剂盒
蛋白电泳伊红黄色染色试剂盒
小鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)elisa检测试剂盒
人层粘连蛋白β1(LN-β1)elisa检测试剂盒
PH9-10显色（THYMOLPHTHALEIN）指示溶液
小鼠脂多糖/内(LPS)elisa检测试剂盒
大鼠内皮素转换酶1(ECE1)elisa检测试剂盒
大鼠白介素15(IL-15)elisa检测试剂盒
小鼠脑钠素/脑钠尿肽(BNP)elisa检测试剂盒免费代测
人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)elisa分析检测试剂盒
组织（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒
木瓜酶抗体
Papain
钙营养蛋白1/钙结合蛋白8抗体
Calneuron 1
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