Kupffer（小鼠肝枯否细胞）上海西格生物科技有限公司

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产品名称：Kupffer（小鼠肝枯否细胞）
产品型号：XG-X9217
产品展商：西格
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简单介绍

Kupffer（小鼠肝枯否细胞）公司正在出售的产品：SNU-1411人直肠腺癌细胞 SHFM3蛋白抗体 Anti-SHFM3 Cy5标记的鼠抗人IgG H&L单克隆抗体 Mouse Anti-Human IgG (3D3) mAb / Cy5 sE-selectin ELISA Kit

产品描述

操作步骤：

步骤1：配制程序冻存液，放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2：离心收集对数生长期的细胞（贴壁细胞消化下来离心，悬浮细胞直接离心，转速1200rpm或250g，时间3min）
步骤3：用配制好的冻存液重悬细胞，按照1~1.5mL/管分装到冻存管中，拧紧管盖，做好标记
步骤4：冻存管放入冻存盒，冻存盒放入-80℃冰箱过夜（24h）
步骤5：冻存管从冻存盒取出，转移至液氮长期保存

方法二：使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液，无需自己配制，无需降温盒，大大提升了便捷性。
但是，并非所有细胞都适用于这种冻存液，使用前必须做冻存测试，没问题后再批量应用。

细胞特性

产品名称	Kupffer（小鼠肝枯否细胞）	英文名称	Kupffer
分类	小鼠细胞系	货号	XG-X9217
组织来源	肝脏	形态

种属来源；小鼠

组织来源；肝脏

生长特性；贴壁生长

形态特征；圆形，不规则

质量检测；巨噬细胞标志物（F4/80）荧光染色为阳性，纯度高于 90%，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、、酵母和等

产品规格；5x105cells/T25或1mL冻存管

培养基；小鼠肝kupffer细胞完全培养基

培养条件；气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

换液频率；每2-3天换液一次

消化液；0.25%胰蛋白酶

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1）收到细胞后，75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代。
一．培养基及培养冻存条件准备
1）准备1640（推荐iCell-0002）培养基；胎牛血清，10%；双抗，1%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

细胞处理

1）冻存细胞的复苏

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

公司正在出售的产品：

着丝粒蛋白S抗体

MHF1/CENPS

脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体

DTYMK

肿瘤抑制转移候选基因3抗体 Anti-TSSC3

Rab蛋白GTP酶激活蛋白1抗体 Anti-RABGAP1

T细胞激活核转录因子4抗体 Anti-NF-ATc4

血管内皮生长因子受体1抗体 Anti-VEGFR1/FLT1

易位相关蛋白α/TRAP-α抗体

TRAP alpha

线粒体核糖体蛋白S12抗体

MRPS12

转绿调节因子SLTM抗体 Anti-SLTM

KLHDC9蛋白抗体 Anti-KLHDC9

p21活化蛋白激酶ARHG7抗体 Anti-PAK3/ARHG7

味觉感受器蛋白T2R38抗体 Anti-T2R38/TAS2R38

Alexa Fluor 555标记小鼠IgG（型对照)

Kupffer（小鼠肝枯否细胞）Mouse IgG / AF555

转录因子HRT3抗体

Hey L

大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa分析检测试剂盒

Casp-9 ELISA Kit

兔白介素-5(IL-5)elisa分析检测试剂盒

RabbitInterleukin5ELISAKit

球蛋白超家族成员10抗体

IGSF10

19号染色体开放阅读框71抗体

C19orf71

组蛋白H2A BBD抗体

Histone H2A-Bbd

5-羟色胺受体3D抗体

5HT3D Receptor

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