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产品资料

MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
  • 如果您对该产品感兴趣的话,可以
  • 产品名称:MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
  • 产品型号:XG-X3660
  • 产品展商:西格
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简单介绍
MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14公司正在出售的产品:RWPE-2 人前列腺正常细胞 基质重塑相关蛋白8抗体 MXRA8 小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)elisa检测试剂盒 酒类尿素比色法定量检测试剂盒 大鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)elisa酶联试剂盒免费代测
产品描述

细胞特性

产品名称

MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

英文名称

MC3T3-E1subclone 14:MC3T3E1subclone 14

分类

小鼠细胞系

货号

XG-X3660

组织来源

颅顶骨

形态

成纤维细胞

细胞别称:MC3T3-E1subclone 14 ;小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14

种属来源:小鼠

年龄性别:新生

组织来源:颅顶骨

生长特性:贴壁生长

细胞形态:成纤维细胞

背景简介:MC3T3-E1subclone 14细胞株是从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。 从含抗坏血酸培养基:生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC3T3亚克隆4MC3T3亚克隆14在抗坏血酸和34mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质(ECM)。MC3T3亚克隆24MC3T3亚克隆30在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化。 不形成ECM, 可以作为亚克隆414的阴性对照。 矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA,及唾液酸糖蛋白(BSP),骨钙素(OCN),和甲状旁腺/甲状旁腺相关蛋白受体的mRNA。高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质,表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1,一种成骨细胞相关转录因子。 植入缺陷小鼠以后,高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨,低分化细胞只是产生纤维组织。 这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型,尤其是ECM信号。 它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。

生物等级:1

细胞规格:1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装

支原体检测:无

基因表达情况:collagen

保藏机构:ATCC; CRL-2594

培养基:90% DMEM+10% FBS+双抗

培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37

冻存条件:无血清冻存液,液氮储存

运输和保存

干冰运输及复苏好存活细胞

(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。                      
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

 细胞处理

1) 冻存细胞的复苏

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

公司正在出售的产品:

长波长敏感的视蛋白抗体

Long wavelength-sensitive opsin

BOLA2蛋白抗体

BOLA2

G蛋白结合蛋白3抗体  Anti-SPG3A/Atlastin

凋亡相关蛋白1抗体  Anti-RYBP/APAP1

G蛋白偶联受体FM4/神经调节肽U受体2抗体  Anti-NMUR2/GPR-FM4

锌指蛋白740抗体  Anti-ZNF740

精子相关抗原11B抗体

SPAG11B

睫状神经根卷曲螺旋蛋白抗体

CROCC

5-羟色胺受体5A抗体  Anti-5HT5A receptor/SR-5A

组蛋白赖氨酸去甲基化酶PHF8抗体  Anti-PHF8

PEG3蛋白抗体  Anti-PEG3

转移生长因子β受体2抗体(TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ)  Anti-TGF beta R2/TGFBR2

Cy3标记羊IgM

MC3T3-E1subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14Goat IgM / Cy3

锌指蛋白879抗体

ZNF879

大鼠抗血小板抗体(IgG)elisa分析检测试剂盒

Rat platelet antibody IgG ELISA kit

小鼠RAR的相关孤独受体C(RORC)elisa分析检测试剂盒

RORCELISAkit

皮质醇(Cortisol)elisa分析检测试剂盒

Shark Cortisol ELISA Kit

人白介素35(IL-35)elisa分析检测试剂盒

IL-35ELISAKit

PSP抗体

Persephin

卷曲螺旋结构域蛋白158抗体

CCDC158

操作步骤:


步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存

方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。

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