细胞特性
产品名称
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小鼠垂体瘤细胞;GT1-7
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英文名称
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GT1-7
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分类
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小鼠细胞系
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货号
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XG-X9719
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组织来源
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大脑,下丘脑
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形态
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成纤维细胞样
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种属来源;小鼠
组织来源;大脑,下丘脑
生长特性;贴壁生长
细胞形态;成纤维细胞样
细胞代数;10代以内
STR位点;Mouse STR 1-1:17;Mouse STR
1-2:19;Mouse STR 2-1:16;Mouse
STR 3-2:14;Mouse STR 4-2:20.3,21.3;Mouse
STR 5-5:13,17;Mouse STR 6-4:17,18;Mouse
STR 6-7:17;Mouse STR 7-1:26.2;Mouse
STR 8-1:13,16;Mouse STR 11-2:16,18;Mouse
STR 12-1:16,17;Mouse STR 13-1:16.2,17;Mouse
STR 15-3:22.3,23.3;Mouse STR 17-2:15;Mouse STR 18-3:16,17;Mouse STR 19-2:12,13;Mouse STR X-1:25,28
细胞规格;1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测;无
保藏机构;BCRJ; 0095; Millipore; SCC116
培养基;DF12+5%FBS+5%HS+1%P/S
培养条件;气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件;无血清冻存液,液氮储存
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理
1)收到细胞后,75%酒精瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议T25培养瓶1:2传代 。
一.培养基及培养冻存条件准备
1) 准备1640(推荐iCell-0002)培养基;胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
细胞处理
1) 冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
公司正在出售的产品:
支原体去除试剂5ml
人超敏前列腺特异性抗原(PSA-U S)elisa检测试剂盒
细胞LCK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
小鼠双糖链蛋白聚糖(BGN)elisa检测试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)elisa检测试剂盒
大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa分析检测试剂盒
小鼠三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)elisa检测试剂盒
人IV形胶原蛋白α3链(COL4A3)elisa检测试剂盒免费代测
组织PAK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)
完整膜蛋白E25A抗体 ITM2A
无脑回的致病基因LIS1抗体 LIS1
Sestrin3抗体 SESN3
SWI/SNF相关基质关联肌动蛋白依赖染色质调控因子亚家族C1抗体 SMARCC1
AF488标记的程序性死亡配体1抗体 PD-L1, Alexa Flour
488 conjugated
AF680标记的运动神经元及胰腺源蛋白1抗体 MNX1/HLXB9,
Alexa Fluor 680 conjugated
胶原蛋白9抗体 Collagen IX
精氨酸酶1抗体 Arginase 1
小鼠垂体瘤细胞;GT1-7抑制素A/Inhibin α重组兔单克隆抗体 Inhibin
alpha
原钙粘附蛋白α4抗体 PCDHA4
范可尼贫血相关蛋白F抗体 FANCF
辅肌动蛋白相关LIM蛋白抗体 PDLIM3
G蛋白偶联受体126抗体 GPR126
G蛋白信号转导调节因子3抗体 RGS3
内切葡聚糖酶25抗体 Endoglucanase 25
嘌呤受体P2X7抗体 P2RX7
大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)elisa检测试剂盒免费代测
小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)elisa检测试剂盒
猫窖蛋白Caveolin-1(CAV1)elisa分析检测试剂盒
钙蛋白酶5抗体
HTRA3/Calpain 5
乳腺癌易感基因2和p21蛋白抑制因子抗体
BCCIP
操作步骤:
步骤1:配制程序冻存液,放在室温备用或放在4℃预冷
步骤2:离心收集对数生长期的细胞(贴壁细胞消化下来离心,悬浮细胞直接离心,转速1200rpm或250g,时间3min)
步骤3:用配制好的冻存液重悬细胞,按照1~1.5mL/管分装到冻存管中,拧紧管盖,做好标记
步骤4:冻存管放入冻存盒,冻存盒放入-80℃冰箱过夜(24h)
步骤5:冻存管从冻存盒取出,转移至液氮长期保存
方法二:使用无血清非程序冻存液
无血清非程序冻存液是一种商品化的冻存液,无需自己配制,无需降温盒,大大提升了便捷性。
但是,并非所有细胞都适用于这种冻存液,使用前必须做冻存测试,没问题后再批量应用。
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