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WB结果中无信号或显示信号弱可能的原因及建议
日期：2024-11-07 16:30
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摘要：
WB结果中无信号或显示信号弱可能的原因及建议：
①你所检测的样本中不表达目的蛋白，选择表达量高的细胞作为阳性对照，用于确定检测样本是否为阴性，同时查阅文献。
②检测样本低表达目的蛋白，提高上样量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂。
③转移不完全或过转移，可以用丽春红染膜并结合染胶(考马斯亮蓝)后确定条带是否转至膜上或转移过头；适当调整转膜的时间和电流。
④抗体不能识别测试种属的相关蛋白，购买抗体前应当认真阅读抗体说明书，确定其是否能够交叉识别测试种属的对应蛋白。
⑤一抗孵育时间不足，建议4℃结合过...
WB结果中无信号或显示信号弱可能的原因及建议：
①你所检测的样本中不表达目的蛋白，选择表达量高的细胞作为阳性对照，用于确定检测样本是否为阴性，同时查阅文献。
②检测样本低表达目的蛋白，提高上样量，裂解液中注意加入蛋白酶抑制剂。
③转移不完全或过转移，可以用丽春红染膜并结合染胶(考马斯亮蓝)后确定条带是否转至膜上或转移过头；适当调整转膜的时间和电流。
④抗体不能识别测试种属的相关蛋白，购买抗体前应当认真阅读抗体说明书，确定其是否能够交叉识别测试种属的对应蛋白。
⑤一抗孵育时间不足，建议4℃结合过夜。
⑥二抗与一抗不匹配，选择针对一抗来源的种属的抗体。
⑦洗膜过度，洗膜时间不宜过长，加入的去垢剂不宜过强或过多，建议使用0.1%的弱去垢剂Tween-20。