荧光定量PCR​​扩增曲线有哪些时期

荧光定量PCR是通过检测并记录反应体系中荧光信号的变化来实时监测整个PCR进程。荧光定量PCR的扩增程序，以荧光染料法为例，扩增程序可分为扩增反应阶段和熔解反应阶段。扩增反应阶段采用两步法扩增，每一次PCR循环结束都检测并记录荧光信号，由此得到一条扩增曲线。

扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。

扩增曲线可以分成四个时期：基线期，指数期，线性期，平台期。

1、基线期：扩增曲线的水平部分，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物**量的变化。

2、指数期：PCR指数扩增期，扩增曲线起峰，每个循环的产物量与初始模板量符合指数关系，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系。

3、线性期：PCR反应后期，由于PCR反应体系各成分的消耗、产物抑制等因素的影响，反应效率降低，产物量与初始模板量不再符合指数关系。

4、平台期：PCR反应停止，PCR产物不再随循环数增加而增加。由于影响PCR扩增的因素错综复杂，每个反应进入平台期的时间和平台期的高低都各不相同。