细胞培养技术有哪些方面？

细胞培养技术是生物医学研究中一个基础且关键的技术，广泛应用于细胞生物学、药理学、遗传学、癌症研究等领域。一个全 面的细胞培养技术总结应该包含以下几个方面：

1. 培养环境

温度：大部分哺乳动物细胞在37°C下培养zui为理想。

湿度：高湿度环境有助于防止培养基过早蒸发，通常在细胞培养箱内维持相对湿度在95%以上。

气体组成：5% CO₂是常用的培养箱气体环境，有助于维持培养基pH的稳定。

2. 培养基和营养物质

培养基类型：液体培养基通常包含必需的氨基酸、糖类、维生素、无机盐、缓冲系统等，不同类型的细胞可能需要特定的培养基。

添加剂：如血清（通常是胎牛血清）、生长因子、激 素、抗生 素等，以支持细胞生长和减少微生物污染。

3. 细胞种类和特性

原代细胞和细胞系：原代细胞直接从组织中分离出来，而细胞系则是通过不断传代获得，可以无限增殖。

贴壁细胞与悬浮细胞：贴壁细胞需要附着在培养容器的表面生长，而悬浮细胞则可以在培养基中自由生长。

4. 培养容器和设备

培养容器：包括组织培养瓶、培养皿、细胞工厂等，根据细胞种类和实验规模选择。

重要设备：细胞培养箱（提供适宜的温度、湿度和CO₂环境）、生物安 全柜（无菌操作）、离心机、显微镜等。

5. 无菌技术

保持操作环境无菌是成功细胞培养的关键，包括使用无菌操作技巧、定期消 毒实验室设备和表面等。

6. 传代和亚克隆技术

传代：定期移除老化的细胞，并将健康的细胞转移到新的培养基中继续生长。

亚克隆：从异质性细胞群体中选择单一细胞，用以建立具有一致性的细胞系。

7. 冻存和复苏

细胞可以在低温下长期保存（通常是液氮温度，-196°C），需要特定的冻存培养基和程序来保护细胞。

8. 质量控制

污染检测：定期检查细胞培养的微生物污染，包括细 菌、真 菌和支原体。

细胞验证：确认细胞的身份和特性，避免交叉污染。