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有血清时转染的注意事项
日期：2024-11-07 22:24
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摘要：
有血清时的转染
血清一度曾被认为会降低转染效率，但只要在DNA-阳离子脂质体复合物形成时不含血清，在转染过程中是可以使用血清的。
转染过程在两步中需要使用培养基做为稀释液：在DNA-阳离子脂质体复合物准备过程以及复合物同细胞接触过程。
在开始准备DNA和阳离子脂质体试剂稀释液时要使用无血清的培养基，因为血清会影响复合物的形成。但在复合物形成后，在加入细胞中前可以加入血清。
阳离子脂质体和DNA的*佳量在使用血清时会有所不同，因此如果你想在转染培养基中加入血清需要对条件...
有血清时的转染
血清一度曾被认为会降低转染效率，但只要在DNA-阳离子脂质体复合物形成时不含血清，在转染过程中是可以使用血清的。
转染过程在两步中需要使用培养基做为稀释液：在DNA-阳离子脂质体复合物准备过程以及复合物同细胞接触过程。
在开始准备DNA和阳离子脂质体试剂稀释液时要使用无血清的培养基，因为血清会影响复合物的形成。但在复合物形成后，在加入细胞中前可以加入血清。
阳离子脂质体和DNA的*佳量在使用血清时会有所不同，因此如果你想在转染培养基中加入血清需要对条件进行优化。
大部分细胞可以在无血清培养基中几个小时内保持健康。对于对血清缺乏比较敏感的细胞，可以使用一些营养丰富的无血清培养基，或者在转染培养基中使用血清。
对于对血清缺乏比较敏感的贴壁细胞，建议使用LIPOFECTAMINE 2000。
细胞状态
众所周知，细胞的生长状态影响实验结果，原代细胞和传代次数多的细胞都不是*佳选择，处于对数生长期的细胞生长状态*好，*适合转染。
同时，我们都知道细胞的密度不宜过大，大家往往注意的都是转染前的密度，失败过很多次的经历告诉大家，转染后的细胞密度更加重要。
有时候转染时间太久，等到进行后续实验时细胞已经肆意生长，漂起来了，岂不前功尽弃，流着眼泪也要告诉大家，考虑好细胞的生长周期和转染的时间进行铺板，建议选择50%~80%区间密度进行细胞转染。