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ELISA测定温育设置
日期:2024-11-07 16:31
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摘要:
温育这一步是ELISA测定中zui容易出现问题的步骤。目前国内ELISA试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟-1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1-2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的**可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在4...
温育这一步是ELISA测定中zui容易出现问题的步骤。目前国内ELISA试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟-1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1-2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。温育常采用的温度有43℃、37℃、室温和4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立ELISA方法作反应动力学研究时,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2小时,产物的**可达顶峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为彻底,在放射免yi测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成zui多的沉淀。但因所需时间太长,在ELISA中一般不予采用。