试剂和样本的控制方法：
一、试剂
1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照国家标准进行生产，已获得国家承认的“三证”，每一个产品都有对应的生产批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。
2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30
min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等；
类风湿因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理；
③检测抗原时，可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
下列是公司产品ELISA试剂盒的详细说明书：
中文名称：ZNRD1人含锌飘带域蛋白1ELISA试剂盒说明书
英文简称：Human Zinc Ribbon Domain Containing Protein 1(ZNRD1)ELISA Kit
产品货号：PH101776
规格：96T/48T
适用范围：仅供科研使用
保存及有效期：2-8℃保存，6个月，-20℃一年
使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
ELISA 试验时，注意事项如下：
1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
（1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。
（3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
（4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要**价廉、**、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 。
长春质碱-d3质量规格：美国进口Catharanthine-d3 大鼠白介素1β(IL-1β)ELISA检测试剂盒RatIerleukin1β,IL-1βELISAKit 96T/48T HumanHyaluronicacid,HAELISA试剂盒人透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
阿苯达唑砜质量规格：美国进口Albendazole Sulfone 人EB病毒早期抗原(EBEA)抗体(IgG)试剂盒 Human EBEA IgG ELISA
kit Humanmalondialchehyche，MDAELISAKit人二(MDA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
培哚普利酰基-α-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Perindopril Acyl-α-D-glucuronide 英文名称MouseActi-vatedproteinCELISAKit小鼠活化蛋白C规格：96T/48T 大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA试剂盒 ，英文名： VEGF ELISA Kit
培哚普利酰基-β-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Perindopril Acyl-β-D-glucuronide 冰冻切片色素(MELANIN)染色试剂盒50 人阿米巴(Amebiasis)ELISA检测试剂盒HumanAmebiasisELISAKit
96T/48T
头孢匹林钠(标准品)Cefapirin 质量规格：含量测定 大鼠25羟维生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA检测试剂盒Rat25-DihydroxyvitaminD3,HVD3ELISAKit
96T/48T
ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70ELISA试剂盒鸡热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T
L-甲状腺素钠;四代甲状腺素钠盐,T4Levothyroxine 质量规格：>98.5%,BR 人弹性蛋白酶2，中性粒细胞(ELA2)试剂盒 Human ELA2 ELISA KIT Human50%complemehemolysis,CH50ELISAKit人血清总补体(CH50)ELISA试剂盒规格：96T/48T
利多卡因质量规格：>98.5% Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒规格：96T/48T 人胆(CH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
利多卡因(标准品)质量规格：含量测定 GST融合蛋白PROTEASE酶切试剂盒10 小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)试剂盒 Mouse 6-keto-prostaglandin
F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit
马西替坦;ACT064992Macitentan质量规格：>99%,内皮素(ET)受体拮抗剂 小鼠维生素D2(VD2)ELISA试剂盒 ，英文名： VD2 ELISA Kit ELISAKitET-1小鼠内皮素1规格：48T/96T
组蛋白去乙酰化酶抑制剂(M 344)M344质量规格：>98%,HDAC抑制剂 小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA检测试剂盒MouseEotaxin1ELISAKit
96T/48T Humanai-perinuclearfactor，APFELISAKit人抗核周因子抗体(APF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
2-硝基咪唑 2-Nitroimidazole质量规格：>98%,原装进口 人过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)试剂盒 Human PPAR-α ElISA Kit 人类嗜T细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
4-(三氟甲基)-1H-咪唑
4-(Trifluoromethyl)-1H-imidazole质量规格：>98% RatEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit大鼠内皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T 小鼠前列环素(PGI2)试剂盒 Mouse prostacycline,PGI2 ELISA Kit
ZNRD1人含锌飘带域蛋白1ELISA试剂盒说明书检测程序：
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。