操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
产品名称 |
英文名称 |
货号 |
PRDX4人过氧化还原酶4博湖elisa试剂盒 |
Human Peroxiredoxin 4(PRDX4)ELISA Kit |
PH101817 |
优势特点:产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体;
2.稳定的重复性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相载体;
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型;
5.节省实验经费。
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
晕苯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)Coronene ELISAKitFK人趋化因子规格:48T/96T 大鼠白介素33(IL-33)试剂盒 Rat Ierleukin 33,IL-33
ELISA Kit
晕苯(升华提)(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Coronene (purified by sublimation) 小鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-13 ELISA Kit CLIAKitfoGF-Alpha(MouseansforminggrowthfactorAlpha)ELISAKit小鼠转化生长因子α规格:48T/96T
心环烯(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)Corannulene 大鼠白细胞分化抗原30(CD30)ELISA检测试剂盒RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T 染色质共沉淀分析(CHIP)20样本
2,5-二苯基-1,3,4-恶二唑(>98.0%(HPLC))质量规格:>98.0%(HPLC)2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole 人Salusin Beta(Salusin β)试剂盒 Human Salusin Beta,Salusin β ELISA Kit
ELISAKitENA-Ab人抗可提取核抗原抗体规格:48T/96T
酮咯酸氨丁三醇Ketorolac Tromethamine 质量规格:>98.5%,USP,BR 载玻片细胞钙ATP酶PMCA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 HumanIerleukin1α,IL-1αELISAKit 人白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
酮咯酸氨丁三醇(标准品)Ketorolac Tromethamine 质量规格:HPLC>98%,标准品 Mouseacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISA试剂盒小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒规格:96T/48T Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISA试剂盒人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
兰索拉唑Lansoprazole 质量规格:干品含量>98%,USP32 小鼠粘蛋白5B(MUC5B)ELISA试剂盒 ,英文名: MUC5B ELISA Kit ELISAKitMHCⅡ/SLAⅡ猪主要组织相容性复合体Ⅱ类规格:48T/96T
兰索拉唑(标准品)Lansoprazole 质量规格:HPLC>98%,标准品 血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA检测试剂盒MonkeyPlateletFactor4,PF-4ELISAKit
96T/48T HumanFibrinELISAKit人纤维蛋白(Fibrin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
马兜铃酸AAristolochic acid A质量规格:HPLC≥98%,标准品 英文名称HumanP53ELISAKit人P53(P53)规格:96T/48T 人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
羟基茜草素/红紫素(标准品)Purpurin质量规格:HPLC≥98%,标准品 动物组织内质网粗提分离试剂盒10 小鼠高密度脂蛋白胆(HDL-C)试剂盒 mouse High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit
反式茴香脑(标准品)cis-Anethol质量规格:HPLC≥98%,标准品 VTGELISA试剂盒鲤鱼卵黄蛋白原规格:96T/48T 血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)ELISA试剂盒 ,英文名: PDGF-BB ELISA Kit
乔松素(标准品)Pinocembrin质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒 ,英文名: Pro-ANP ELISA Kit MouseCeruloplasmin,CP/CERELISA试剂盒小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒规格:96T/48T
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
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