操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
产品名称 |
英文名称 |
货号 |
CORO1A人冠蛋白1A博湖elisa试剂盒 |
Human Coronin 1A(CORO1A)ELISA Kit |
PH101845 |
优势特点:产品仅用于科研
1.高效、灵敏、特异的抗体;
2.稳定的重复性和可靠性;
3.吸附性能好,空白值低,孔低透明度高的固相载体;
4.使用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养液、尿液、唾液等等多种标本类型;
5.节省实验经费。
组成及试剂配制 :
1. 酶联板:一块(96孔)
2. 标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml,临用前15分钟内配制。
如配制50 ng/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3. 样品稀释液:1×20ml/瓶。
4. 检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5. 检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6. 检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7. 检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
玉米素质量规格:>98%,BRZeatin CLIAKitforVEELISAKit大鼠维生素E规格:48T/96T 大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
水飞蓟素质量规格:水飞蓟素UV 80%;单宾30%Silymarin 印迹或沉淀裂解液用于WESTERN或IP 人胃内因子(GIF)试剂盒 Human Gasic ininsic factor,GIF ELISA kit
坎地沙坦酯(标准品)质量规格:UV法含量测定Candesartan cilexetil ELISAKitGPC-3人1脂酰肌醇蛋白聚糖3规格:48T/96T 线粒体异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样
盐酸坦洛新(标准品)质量规格:含量测定Tamsulosin 小鼠C型尿肽(CNP)ELISA试剂盒 ,英文名: CNP ELISA Kit Ratpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISA试剂盒大鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
替诺福韦富马酸(标准品)质量规格:≥98%,标准品Tenofovir/Tenofovir
disoproxil fumarate 人铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA检测试剂盒HumanCeruloplasmin,CP/CERELISAKit
96T/48T Humanapelin13,AP13ELISA试剂盒人apelin13(AP13)ELISA试剂盒规格:96T/48T
替诺昔康质量规格:>99%,BP2007,EP5.Tenoxicam 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)试剂盒 Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit HumanCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit人Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒规格:96T/48T
替拉替尼质量规格:HSP90 抑制剂,BR,进分17-AAG 英文名称Ratpregnancyassociatedplasmaprotein-AELISAKit大鼠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒规格:96T/48T 人6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
盐酸特拉唑嗪质量规格:>98.5%,二水合物Terazosin HCl 活化凝血因子13(FACTORXIIIa)活性荧光定量检测试剂盒20 兔p53(p53)试剂盒 Rabbit p53/tumor protein,p53/TP53
ELISA Kit
氯化铯质量规格:>99%,分子生物学级Cesium chloride Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISA试剂盒兔子髓1脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 人抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒 ,英文名: AMA ELISA Kit
5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基半乳糖苷质量规格:分子生物学级X-Galactosamidide 小鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-23 ELISA Kit RatIerleukin5,IL-5ELISA试剂盒大鼠白介素5(IL-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T
岩藻黄质;褐藻素质量规格:BR,UV>30%Fucoxanthin 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA检测试剂盒Rat1,3-βDglucosidaseELISAKit 96T/48T HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISA试剂盒人谷胱甘肽硫转移酶pi基因(GSTpi)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Brij
58质量规格:BRBrij 58 人Toll样受体2(TLR2)试剂盒 human TLR2 ELISA Kit
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰岛淀粉样多肽(IAPP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
CORO1A人冠蛋白1A博湖elisa试剂盒服务:
我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。