试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行生产,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的生产批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30
min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用2-巯基乙醇加入到标本稀释液中使RF降解。
下列是公司产品ELISA试剂盒的详细说明书:
中文名称:NAT8人N-乙酰转移酶8特价elisa试剂盒
英文简称:Human N-Acetyltransferase 8(NAT8)ELISA Kit
产品货号:PH103101
规格:96T/48T
适用范围:仅供科研使用
保存及有效期:2-8℃保存,6个月,-20℃一年
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品
150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品
150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
ELISA 试验时,注意事项如下:
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要**价廉、**、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入 。
苷松新酮(标准品) Nardosinone
质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗肌蛋白(UN)ELISA试剂盒 ,英文名: UN ELISA Kit
白花前胡乙素(标准品) Praeruptorin B 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)ELISA试剂盒 ,英文名: EMA IgA ELISA Kit
白术内酯Ⅱ;苍术内酯II(标准品) Atractylenolide II 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISA检测试剂盒Mouseai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit
96T/48T
断血流皂苷A(标准品) Clinodiside A
质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA检测试剂盒Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit
96T/48T
三白草酮(标准品) Sauchinone
质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒 ,英文名: TPO-Ab ELISA Kit
大黄素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷(标准品) Emodin-8-glucoside 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 ,英文名: ATGA/TGAB ELISA Kit
异莲心碱(标准品) Isoliensinine
质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA检测试剂盒Mousetarate-resistaacidphosphatase5b,ACP-5bELISAKit
96T/48T
莲心碱高氯酸盐(标准品) Liensinine Perchlorate 质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗抗体(AsAb)ELISA试剂盒 ,英文名: AsAb ELISA Kit
丁烯基苯酞(标准品) 3-Butylidenephthalide 质量规格:HPLC≥98%,标准品川芎提取,液体 小鼠抗**(ADH)ELISA试剂盒 ,英文名: ADH ELISA Kit
茯苓酸(标准品) Pachymic acid
质量规格:HPLC≥98%,标准品 小鼠抗**/血管加压素/精氨酸加压素(ADH/VP/AVP)ELISA检测试剂盒Mouseaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVPELISAKit
96T/48T
HepG2/2-15细胞,人肝癌细胞 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,RAW 264.7细胞 大耳山羊皮肤细胞;LDG-3木蝴蝶苷B(标准品)Oroxin B质量规格:HPLC≥98%,标准品
MCF-7(人癌细胞) 5×106cells/瓶×21霉素氨丁三醇Fosfomycin tromethamine质量规格:>98%,BR
Promocell
C-22111 Endothelial Cell GrowthMedium 2 KIT, 内皮细胞生长培养基2型套装 500ml1霉素氨丁三醇(标准品)Fosfomycin tromethamine质量规格:含量测定
人成纤维母细胞-胎儿HDF-f木犀草苷(标准品)Cynaroside质量规格:HPLC≥98%,标准品
CDH15
Others Rat 大鼠 Cadherin-15 / CDH15 人细胞裂解液 (阳性对照) 木香烃内酯(标准品)Costundide质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠神经胶质细胞衍化营养因子(mouse GDNF) 作用:
ELISA 规格: 48T/96T
进口分装 Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate 1738-76-7
中文名: 分子式:C16H19NO5S
小鼠神经降压肽()ELISA试剂盒 96T/48T
试剂盒 组装/原装 Ikshusterol 3-O-glucoside 中文名:
分子式:C35H60O7 度:%
小鼠神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒 96T/48T
试剂盒 组装/原装 Ikshusterol 3-O-glucoside 中文名:
分子式:C35H60O7
小鼠神经激肽A(NKA)ELISA试剂盒 96T/48T
试剂盒 组装/原装 Ikshusterol 3-O-glucoside 112137-81-2
中文名: 分子式:C35H60O7 度:% 关键词: 异株荨麻; 豆甾烷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体elisa试剂盒 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒
规格型号:96T/48T 小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体试剂盒、小鼠少突胶质细胞髓鞘糖蛋白抗体eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Loroglossin
中文名: 分子式:C34H46O18
NAT8人N-乙酰转移酶8特价elisa试剂盒检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。