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  • 产品名称:chang liver细胞

  • 产品型号: BH-8010758
  • 产品厂商:派瑞曼
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简单介绍:
chang liver细胞来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
详情介绍:

细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

产品名称

chang liver细胞

规格

详见说明书

货号

BH-8010758

细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等; 
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

实验报告:
一、分离与培养:
    1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
    3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
    5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、荧光鉴定:
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
    2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
    5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
    6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
2,3,6-三氯甲苯标准品 Carminicacid(E120) 2077-46-5 10ng/ul于甲醇,1ml 特征形态 固态

(Z)-苯氧菌胺, 标准品 Ethoxyfen 133408-51-2 10ng/ul于乙腈,1ML 特征形态 固态

菲,10ng/ul 标准品 Phenanthrene 31055 10ng/ul于环己烷,10ml 特征形态 固态
pTH (3-34) (bovine)  pTH (44-68) (human)  Suc-AEPF-AMC  MeOSuc-AFK-AMC  Osteostatin (human)

(Nle8·18,Tyr34)-pTH (3-34) amide (bovine)  Biotinyl-pTH (44-68)(human)  Suc-AEPF-pNA  Suc-AFK-AMC  Osteostatin amide(human), pTH-rP (107-139) amide (human)

Z-GPA-OH  Z-GGR-4Mβ NA  Epidermal Dipeptide  H-Tyr-D-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline- 3-carboxamide  Osteostatin (1-5)(human, bovine, dog, horse, mouse, rabbit,

Z-GPLGP-OH  Z-GGR-β NA  Pyr-FG-NH2  TIPP  Osteostatin (1-5) amide(human, bovine, dog, horse, mouse, ra

Z-KP-4Mβ NA  Z-GGL-AMC  Pyr-FG-pNA  Orexin A (human, bovine,canine, mouse, ovine, porcine, rat)  Ovalbumin (257-264)(chicken)
植酸 HPLC≥94% 20mg MouseAlanineAminoansferase,ALT/GPTELISA试剂盒小鼠氨酸转氨酶/谷转氨酶(ALT/GPT)ELISA试剂盒规格:96T/48T

植酸钙 HPLC≥98% 20mg Mousealkalinephosphatase,ALPELISA试剂盒小鼠碱性0酸酶(ALP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

植酸钠 HPLC≥98% 20mg MouseAlpha-fetoprotein,AFPELISA试剂盒小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

植酸锌 HPLC≥98% 20mg Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1,AFP-L1ELISA试剂盒小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒规格:96T/48T

酯蟾毒配基 HPLC≥98% 20mg Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2,AFP-L2ELISA试剂盒小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)ELISA试剂盒规格:96T/48T

重楼皂苷E HPLC≥98% 20mg Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISAKit小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒规格:96T/48T

重楼皂苷I HPLC≥98% 20mg Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISA试剂盒小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)ELISA试剂盒规格:96T/48T

重楼皂苷II HPLC≥98% 20mg Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格:96T/48T

chang liver细胞重楼皂苷VI HPLC≥98% 20mg Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA试剂盒小鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格:96T/48T

重楼皂苷VII HPLC≥98% 20mg Mousealpha-L-fucosidase,AFUELISA试剂盒小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA试剂盒规格:96T/48T

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