产品名称：hacat细胞

细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

实验报告：
一、分离与培养：
    1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
    3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
    5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、荧光鉴定：
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
    2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
    3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
    5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
    6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作：
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
2,4,5-Trichlorophenol ethanolamine salt,c 2,4,6-Tri-tert-butylphenol - 纯品型，0.1G 特征形态 固态

3,4,5-Trichlorophenol acetate Tributylethyltin - 纯品型，25mg 特征形态 固态

2,3,4-Trichlorophenol acetate Tribromomethane - 纯品型，25mg 特征形态 固态
Acetyl-(D-Arg10,Cys11,D-Phe14,Cys17)-β -MSH (10-17) amide  Myelin Basic Protein (4-14)  Abz-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dap(Dnp)-Ala-Arg-NH2  Mca-PLGL-Dap(Dnp)-AR-NH2  LHRH (free acid)

Acetyl-(Cys11,D-2-Nal14,Cys18)-β -MSH (11-22) amide  (Des-Gly77,Des-His78)- Myelin Basic Protein(68-84) (bovine)  Ac-Pro-Leu-Gly-OH  Mca-PLGLEEA-Dap(Dnp)-NH2  LHRH (1-5) (free acid)

(Deamino-Cys11,D-2- Nal14,Cys18)-β -MSH (11-22) amide, JKC-3  (Des-Gly77,Des-His78)-Myelin Basic Protein (68-84) (guinea p  CTT  Mca-PKPLAL-Dap(Dnp)-AR-NH2  LHRH (1-6) (free acid)

β -MSH (monkey), β -MSH(5-22) (human)  Myelin Basic Protein(83-99) (bovine)  DABCYL-γ -Abu-PQGL-Glu(EDANS)-AK-NH2  Peptide 74  LHRH (1-6) amide

β -MSH (porcine), β -Lipotropin (41-58) (porcine)  Myelin Basic Protein (87-99) (human, bovine, rat)  Dnp-RPLALWRS-OH  Metorphamide  (D-Leu6)-LHRH (1-8)(free acid)
皂土(膨润土)(Bentone SD-1,适于中至低极性溶剂)  Bentonite  质量规格：Bentone SD-1,适于中至低极性溶剂 犬透明质酸(HA)试剂盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit

皂土(膨润土)(Bentone SD-2,适于中高极性溶剂)  Bentonite  质量规格：Bentone SD-2,适于中高极性溶剂 犬透明质酸酶1(HAase 1)试剂盒 Canine Hyaluronidase 1,HAase 1 ELISA Kit

活性炭粉(AR,200目,粉末状,褐色)  Activated charcoal  质量规格：AR,200目,粉末状,褐色 犬透明质酸酶2(HAase 2)试剂盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit

活性炭(CP,200目,粉末状,褐色)  Activated charcoal  质量规格：CP,200目,粉末状,褐色 犬透明质酸酶3(HAase 3)试剂盒 Canine Hyaluronidase 3,HAase 3 ELISA Kit

活性炭颗粒(AR,20-50目)  Activated charcoal  质量规格：AR,20-50目 犬透明质酸酶4(HAase 4)试剂盒 Canine Hyaluronidase 4,HAase 4 ELISA Kit

活性炭(电镀脱色,200目,from wood)  Activated charcoal  质量规格：电镀脱色,200目,from wood 犬维生素A(VA)ELISA检测试剂盒CanineVitaminA,VAELISAKit 96T/48T

活性炭(催化剂载体,8-16目)  Activated charcoal  质量规格：催化剂载体,8-16目 犬维生素A(VA)试剂盒 Dog Vitamin A,VA ELISA Kit

活性炭(净水、气体化,棒,φ1.0mm)  Activated charcoal  质量规格：净水、气体化,棒,φ1.0mm 犬维生素E(VE)ELISA检测试剂盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T

活性炭(净水、气体化,10-24目)  Activated charcoal  质量规格：净水、气体化,10-24目 犬维生素E(VE)试剂盒 Canine Vitamin E,VE ELISA Kit

活性炭(电镀脱色,40-60目,from Nutshell)  Activated charcoal  质量规格：电镀脱色,40-60目,from Nutshell 犬维生素K1(VK1)ELISA检测试剂盒CanineVitaminK1,VK1ELISAKit 96T/48T
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
hacat细胞通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等； 
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。