产品名称 |
DLD-1细胞 |
规格 |
T25 |
货号 |
BH-0109332 |
产品详细 结直肠腺癌上皮细胞;DLD-1
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 DLD-1是1977-1979年间D.L.Dexter和同事分离的两株结直肠腺癌细胞株中的一株。在ATCC和其它地方进行的DNAfingerprinting和染色体组型分析表明这株细胞与HCT-15(CCL-225)相似,说明这两者是来自同一个人的不同克隆。他们的遗传起源可通过DNAfingerprinting证实,但染色体组型分析显示它们缺乏染色体标记一致改变或数目上一致改变。细胞的CSAp阴性(CSAp-)。DLD-1细胞的p53抗原表达呈阳性(p53抗原产生了一个CS->
培养条件 RPMI1640+10%FBS
传代方法 消化5分钟。1:2。4-5天长满。
细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM
EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
氧化酶 英文名称: Human Xahione
oxidase 规格:
48T/96T 英文缩写: XOD Androst-5-ene-3β,17β-diol 3,17-diacetate 中文名:雄甾-5-烯-3β,17β-二醇 3,17-二乙酸酯 分子式:C23H34O4 度:98.0%
氧化低密度脂蛋白
英文名称: oxidized low
density lipoprotein 规格: 48T/96T 英文缩写:
OxLDL Qingyan
齐墩果酸 HPLC≥98% 20mg 化线粒体冻存液(酶学和膜结构保护)50毫升
齐墩果酸OβD葡萄糖( →)αL鼠李糖(→)αL阿拉伯糖苷 HPLC≥98% 5mg RatInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISA试剂盒大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
齐墩果酮酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠载脂蛋白F(APOF)ELISA试剂盒 ,英文名: APOF ELISA Kit
奇任醇 HPLC≥98% 20mg 猴E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA检测试剂盒MonkeyE-SelectinELISAkit 96T/48T
千层纸素 HPLC≥98% 20mg 犬结蛋白(Des)试剂盒 Dog desmin,Des ELISA Kit
千层纸素AβD葡萄糖醛酸苷 HPLC≥94% 5mg 英文名称HumanSerumamyloidAELISAKit人血清淀粉样蛋白A(SAA)规格:96T/48T
千金藤素 HPLC≥98% 20mg 化线粒体冻存液(生物能量学保护)50毫升
千金子二萜醇 HPLC≥98% 20mg RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein1,IGFBP-1ELISA试剂盒大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 HPLC≥98% 20mg 小鼠载脂蛋白E(Apo-E)ELISA试剂盒 ,英文名: Apo-E ELISA Kit
千金子甾醇 HPLC≥98% 20mg 小鼠α干扰素(IFN-α)ELISA检测试剂盒MouseIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
猪弓形虫抗体快速检测卡Estra,9-diene,17-dione51736甲基双烯双酮
猪瘟病毒CSFV快速检测卡Methoxydienone23227沃氏物
猪弓形虫抗原快速检测卡Methasterone33818甲基屈他雄酮
猪轮状病毒PRV快速检测卡Labetalol 3274盐酸拉贝洛尔
猪流感病毒SIV快速检测卡17β-Hydroxy7-methylandrosta,9(11)-dien-one39717β-羟基7-甲基雄甾,9(11)-二烯-酮
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5DLD-1细胞.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。