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  • 产品名称:TE353.SK细胞

  • 产品型号: BH-0109489
  • 产品厂商:派瑞曼
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简单介绍:
TE353.SK细胞来源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等知名品牌),活力>95%,贴壁性好。我们从试剂、包被器皿、冻存原代细胞、新鲜原代细胞、原代细胞的分子学实验等提供全程服务。我司拥有专业的实验室,可无菌操作并提供相关科研项目解决方案以及实验服务。
详情介绍:

细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。

产品名称

TE353.SK细胞

规格

T25

货号

BH-0109489

产品详细 正常皮肤细胞;TE353.SK
形态特性
生长特性 贴壁生长
特征特性
培养条件 DMEM(高糖)+10%FBS
传代方法 1:2传代
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等; 
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

实验报告:
一、分离与培养:
    1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
    2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
    3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
    5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、荧光鉴定:
    1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
    2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
    3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
    5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
    6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠神经丝蛋白elisa试剂盒   小鼠神经丝蛋白试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠神经丝蛋白试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠神经丝蛋白试剂盒、小鼠神经丝蛋白elisa试剂盒   保存条件:2-8℃   保质期:6个月。  Iloperidone  中文名:伊潘立酮  分子式:C24H27FN2O4  度:98.0%

小鼠神经丝蛋白(NF)ELISAKit     Bis(phenylacetyl) disulfide  中文名:双(苯乙酰)
美洲茶酸 HPLC≥98% 5mg 蛋白定量样品预处理试剂100

迷迭香酸甲酯 HPLC≥98% 5mg Ratmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒规格:96T/48T

米内苷 HPLC≥98% 5mg 小鼠序列相似家族135成员B(FAM135B)ELISA试剂盒 ,英文名: FAM135B ELISA Kit

米仔兰碱 HPLC≥98% 5mg 兔子血小板活化因子(PAF)ELISA检测试剂盒rabbitplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T

米仔兰酸碱 HPLC≥98% 5mg 犬Bcl-2相关X蛋白(BAX)试剂盒 Canine Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit

绵枣儿素  HPLC≥98% 5mg 英文名称HumanPSAELISAKit人前列腺特异性抗原(PSA)规格:96T/48T

木里岚二醇 HPLC≥98% 5mg 蛋白定量样品预处理试剂100

苜蓿素 HPLC≥98% 5mg Ratmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISA试剂盒大鼠基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒规格:96T/48T

穆茱萸内酯醇 HPLC≥98% 5mg 小鼠脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA试剂盒 ,英文名: BrdU ELISA Kit

南五味子酸 HPLC≥98% 5mg 小鼠胰蛋白酶(ypsin)ELISA检测试剂盒MouseypsinELISAKit 96T/48T
氯羟吡啶残留酶联检测试剂盒Cyproterone acetate4271醋酸环丙氯地孕酮

叶酸酶联检测试剂盒Cyproheptadine 9693盐酸赛庚啶

维生素B12酶联检测试剂盒Cynatratoside A973996白薇苷A

TE353.SK细胞β-兴奋剂类残留酶联检测试剂盒Cynanoside F1002

孔雀石绿残留酶联检测试剂盒Cyclopropyl 2-fluorobenzyl ketone13223


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