细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
产品名称 |
LLC细胞 |
规格 |
T25 |
货号 |
BH-0109628 |
产品详细 小鼠肺癌细胞;LLC
形态特性 其他
生长特性 贴壁生长
特征特性 小鼠Lewis肺癌细胞
培养条件 DMEM(高糖)+10%FBS
传代方法 消化CQ-5分钟,1:2,3天内可长满
细胞生物学研究有以下几个方面。产品仅用于科学研究
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括。
①细胞核、染色体以及基因表达的研究。
②生物膜与细胞器的研究。
③细胞骨架体系的研究。
④细胞增殖及其调控。
⑤细胞分化及其调控。
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)。
⑦细胞的起源与进化。
⑧细胞工程。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM
EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
小鼠骨保护素elisa试剂盒
小鼠骨保护素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠骨保护素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠骨保护素试剂盒、小鼠骨保护素eisa试剂盒
保存条件:2-8℃
保质期:6个月。
Dehydroepiandrosterone enanthate 中文名:普拉雄酮庚酸酯 分子式:C26H40O3
小鼠骨保护素(OPG)ELISAKit Indapamide
26807-65-8 中文名:吲达帕
醋酸舍莫瑞林 Sermorelin
Acetate 质量规格:≥98.0% 动物肾上腺组织细胞分离培养试剂盒10
磺胺嘧啶银 Silver Sulfadiazine 质量规格:>98%,USP31,BR RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISA试剂盒大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
磺胺嘧啶银(标准品) Silver Sulfadiazine 质量规格:>98%,标准品 小鼠糖原合酶激酶3α(GSK3α)ELISA试剂盒 ,英文名: GSK3α ELISA Kit
辛伐他汀 Simvastatin 质量规格:>99%,BR,细胞培养级 豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA检测试剂盒GuineapigLebtospiraIgGELISAKit 96T/48T
辛伐他汀,辛伐他丁(标准品) Simvastatin 质量规格:HPLC>98%,标准品 牛球蛋白G(IgG)试剂盒 Bovine Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
康普瑞汀二钠盐 Combretastatin A4 di phosphate (CA4P) 质量规格:>98% 英文名称HumanCyclicguanosinemonophosphateELISAKit人环-0鸟苷(cGMP)规格:96T/48T
硫酸西梭米星/硫酸西索霉素 Sisomicin Sulfate 质量规格:≥580IU/ mg,BR 动物肾脏组织细胞分离培养试剂盒10
硫酸西梭米星(标准品) Sisomicin Sulfate 质量规格:含量测定 RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISA试剂盒大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒规格:96T/48T
生长抑素 Somatostatin Acetate 质量规格:≥98%,BR,醋酸盐形式 小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒 ,英文名: GSK ELISA Kit
链脲佐菌素(STZ)
Streptozocin 质量规格:>99%,用于药理造模 小鼠白介素4(IL-4)ELISA检测试剂盒MouseIerleukin4,IL-4ELISAKIT 96T/48T
产肠/志贺大肠埃希氏菌(ETEC/SETC)核酸快速检测试剂盒 PCR法测/盒Digalactosyldiacylglycerol14338双半乳糖二酰甘油
LLC细胞肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC)核酸快速检测试剂盒 PCR法测/盒Diethyl 2-acetamido-phenethylmalonate54632
五种致泻性大肠埃希氏菌核酸快速检测试剂盒 PCR法测/盒Diethyl 2-acetamido-(4-octylphenethyl)malonate1623588
副溶血性弧菌核酸快速检测试剂盒 PCR法测/盒Di-Dnp-L-Lysine16559二-二基-L-赖氨酸
铜绿杆菌(绿脓杆菌)核酸快速检测试剂盒 PCR法测/盒Dicyclanil1126363地昔尼尔