菌种的培养:
1、是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。产品仅用于科研
产品名称
野油菜黄单胞菌
英文名称
Xanthomonas
campestris
货号
BH-J011250
产品名称:野油菜黄单胞菌
编号:BH-J011250
拉丁文:Xanthomonas campestris
提供形式: 冻干物
**等级: 1
模式菌株: no
应用领域: 黄原胶生产菌。
培养基: 营养肉汁琼脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 20.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。
生长条件: 30℃,好氧
存储条件: 真空冷冻干燥法
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围广的微生物保存法。
微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 放线菌孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为种子,把种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
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二甲基亚砜(Standard for GC,≥99.95%(GC)) Dimethyl sulfoxide 质量规格:Standard
for GC,≥99.95%(GC) 人60S核糖体蛋白L36a-样(RPL36AL)试剂盒 Human
RPL36AL ELISA kit
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC)) n-Decyl alcohol 质量规格:Standard
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96T/48T
琥珀酸二乙酯(standard for GC,≥99.6%(GC)) Diethyl succinate 质量规格:standard
for GC,≥99.6%(GC) 人6-羟多巴胺(6-OHDA)试剂盒 Human 6-hydroxydopamine,6-OHDA ELISA Kit
癸二酸二乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) Diethyl sebacate 质量规格:Standard
for GC, ≥99.5% (GC) 人6酮前列腺素(6-K-PG)试剂盒 Human 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA
Kit
二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC)) Docosane 质量规格:standard
for GC,≥99.0%(GC) 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)试剂盒 Human
6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit
三十二烷(standard for GC,≥98.0%(GC)) Dotriacontane 质量规格:standard
for GC,≥98.0%(GC) 人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)试剂盒 Human
OGG1 ELISA kit
正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC)) 1-Heptanol 质量规格:Standard for GC,>99.5%(GC) 人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)试剂盒 Human
8-Hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG ELISA kit
γ -丁内酯(GBL)(standard for GC,≥99.9%(GC))
4-Hydroxybutanoic acid lactone 质量规格:standard for GC,≥99.9%(GC) 人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)试剂盒 Human 8-epi-prostaglandin
F2alpha,8-epi-PGF2α ELISA Kit
丙位庚内酯(Standard for GC ,>98.5%(GC)) γ-Heptalactone 质量规格:Standard
for GC ,>98.5%(GC) 人8异前列腺素(8-iso-PG)试剂盒 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit
(+)-葑酮(standard for GC, ≥99.5% (GC))
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118292-40-3 Tazarotene
5mg Raillietina echinobothrida棘盘瑞氏绦虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度
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Raillietina spp.瑞氏绦虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度
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