| 产品名称 |
人II型肺泡上皮细胞 |
|
英文名称 |
Human primary type II alveolar epithelial cells |
|
产品规格 |
5×105 |
|
货号 |
P-X1254 |
包装规格：1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶 细胞介绍：
Ⅱ型肺泡细胞（ATⅡ）又称颗粒肺泡细胞，散在分布于ATⅠ肺泡细胞（ATⅠ）之间及其相邻的肺泡间隔结合处。其体积较小，呈立方形，表面稍突向肺泡腔。细胞核大而圆，胞质染色较浅淡，胞质中常见空泡。数量较ATⅠ多，ATⅡ占肺泡上皮细胞总数的14%到16%，但仅覆盖5℅的肺泡表面。ATⅡ体积比ATⅠ小很多，人约为900um3 .在细胞游离面有较多的短微绒毛，尤其在细胞边缘部更多。细胞表面有 MPA凝集素，对α-半乳糖残基有特异性反应。相邻细胞以紧密连接或中间连接相连，胞质内有较多的线粒体和粗面内质网，还有多泡体、溶酶体和板层体[1]。
ATⅡ是肺泡上皮细胞的“干细胞”，它的功能多样：能增殖成新的ATⅡ，还可以分化为其他上细胞如ATⅠ；合成和分泌表面活性物质的功能；肺水转运功能；强大的功能。这些功能与以下有密不可分的关系。
细胞特性：
1)细胞来源于人正常肺组织。2)细胞鉴定：肺表面活性蛋白 A（SP-A）或肺表面活性蛋白 C（SP-C）荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于 90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、酵母。
5)细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。
推荐培养基：
我们推荐使用Delf原代上皮细胞培养体系作为体外培养的培养基。产品的运输和保存：
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
注意事项：
1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时，虽然被分散成单个细胞，但它们之间的互相影响还是存在的， 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质， 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低， 细胞之间的促生长作用很小， 虽然营养物质很充足， 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大，会导致营养物质供应不足， 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度， 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用， 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破，分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大，在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说，尽快使接种的细胞贴壁，是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h，由于细胞悬液中带有少量培养液， 细胞即可以维持存活， 又可以很快接触到培养瓶底壁， 是细胞迅速黏附于底物，待细胞贴壁后，再补足培养液继续培养。
3、分离细胞培养法—悬浮型细胞培养 。
操作步骤如下：
1、剪切组织：先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用弯头眼科剪，反复剪切组织，直到组织成糊状，约1mm3大小。静置片刻后，用吸管吸去上层液体，加入适当的缓冲液再清洗一次。
2、消化分离：消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。
3、培养：细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。
公司正在出售的产品：
| 大鼠结肠神经元细胞 | TM4细胞 | pNICKclos2.0 |
| 大鼠肝间质细胞 | TM3细胞 | Polycephalomyces nipponicus |
| 大鼠肝成纤维细胞 | AML12细胞 | pPinkα-HC |
| 大鼠肠间质细胞 | P388细胞 | PPRE X3-TK-luc |
| 大鼠胃黏膜成纤维细胞 | CFSCS-2G细胞 | pREDKI |
| 大鼠肝卵圆细胞 | NFS-60细胞 | pRL-TK |
| 大鼠肠微血管内皮细胞 | mouseHC11细胞 | pRS403 |
| 大鼠肠神经胶质细胞 | minkMv.l.lu细胞 | pRS423 |
| 大鼠腹膜间皮细胞 | C2C12细胞 | pRS424 |
| 大鼠肠巨噬细胞 | L5178YTK+/-clone(3.7.2C)细胞 | pRS425 |
| 大鼠内括约肌平滑肌细胞 | YACS-1细胞 | pRS426 phagemid in E. coli |
| 大鼠肠道干细胞细胞 | EL4细胞 | pRSETA |
| 大鼠肠粘膜上皮细胞 | E.G7-OVA细胞 | pRSFDuet-1 |
| 小鼠腹腔巨噬细胞 | L1210细胞 | pRSV-Rev |
| 大鼠肾小管上皮细胞 | CTLL-2细胞 | Pseudozyma aphidis |
| 大鼠肾小球系膜细胞 | G422细胞 | PSH65 |
| 大鼠肾小球内皮细胞 | GTCQ-E1细胞 | pShuttle |
| 大鼠肾足细胞 | GT1.1 /GTCQ-E1细胞 | Psilocybe pseudobullacea |
| 大鼠输尿管上皮细胞 | Bv-2细胞 | psPAX2 |
| 大鼠输尿管平滑肌细胞 | bend.3细胞 | 人II型肺泡上皮细胞pTrc99a |