产品名称：人食管上皮细胞

产品规格：>5×105细胞数
包装规格：1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶

公司所有产品均不得用于临床诊断，仅可用于工业或科研等非医疗目的。

细胞介绍：

食管是咽和胃之间的消化管，哺乳动物的食管结构上由内向外分四层 :黏膜层、黏膜下层、肌层、外膜。其中上皮细胞主要在黏膜层，其上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮，耐摩擦，有保护作用。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。在食管与胃贲门交界处，复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。
食管损伤、从而导致食管长期的慢性炎症、溃疡，或慢性刺激，进而食管上皮增生，后导致癌变。实验证明，弥漫性或局灶性上皮增生可能是食管癌的癌前期病变。在食管癌的发生中，上皮 -间质转化( EMT)是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程，有利于肿瘤转移。

1) 细胞来源于人正常食管组织。
2) 细胞鉴定：广谱角蛋白（PCK）免yi荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于 90%。
4) 不含有  HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细jun、酵母和真jun。
5) 细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。

我们推荐使用 Delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

注意事项：

1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时，虽然被分散成单个细胞，但它们之间的互相影响还是存在的， 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质， 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低， 细胞之间的促生长作用很小， 虽然营养物质很充足， 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大，会导致营养物质供应不足， 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度， 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用， 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破，分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大，在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说，尽快使接种的细胞贴壁，是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h，由于细胞悬液中带有少量培养液， 细胞即可以维持存活， 又可以很快接触到培养瓶底壁， 是细胞迅速黏附于底物，待细胞贴壁后，再补足培养液继续培养。
3、分离细胞培养法—悬浮型细胞培养 。

操作步骤如下：

1、剪切组织：先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用弯头眼科剪，反复剪切组织，直到组织成糊状，约1mm3大小。静置片刻后，用吸管吸去上层液体，加入适当的缓冲液再清洗一次。
2、消化分离：消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。
3、培养：细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。
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