大鼠胰腺星状细胞上海博湖生物科技有限公司

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产品名称：大鼠胰腺星状细胞
产品型号：P-X1609
产品**：派瑞曼
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简单介绍：

大鼠胰腺星状细胞正在出售的产品：狗皮下微血管内皮细胞大鼠胸腺细胞人肺腺癌耐顺铂株A549/DDP大鼠胰腺上皮细胞大鼠zi宫内膜基质细胞

详情介绍：

公司所有产品均不得用于临床诊断，仅可用于工业或科研等非医疗目的。

产品名称	大鼠胰腺星状细胞
英文名称	Rat pancreatic stellate cells
产品规格	5×105
货号	P-X1609

操作步骤如下：

1、剪切组织：先将所取得的组织，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后，用手术刀将组织切成若干小块，移入青霉素小瓶或小烧杯中，加入适量缓冲液，用弯头眼科剪，反复剪切组织，直到组织成糊状，约1mm3大小。静置片刻后，用吸管吸去上层液体，加入适当的缓冲液再清洗一次。
2、消化分离：消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞，以利于进一步的培养，常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。
3、培养：细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为（2～5）×105 cells／ml，或实验所需密度，分装于培养瓶中，使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内，5％CO2，37℃静置培养。一般3～5d，原代培养细胞可以黏附于瓶壁，并伸展开始生长，可补加原培养液量1／2的新培养液，继续培养2～3d后换液，一般7～14d可以长满瓶壁，进行传代。

细胞介绍：

胰腺进行性纤维化是慢性胰腺炎典型的病理表现，在这个过程中扮演中心角色的是一种多角形或星状细胞，即胰腺星状细胞。
胰腺星状细胞分布在胰腺小叶间和腺泡间，在胰腺纤维化过程中，其被多种病理因子激活，分泌多种细胞外基质，包括胶原、启动和促进了纤维化这一病理过程。正常情况下，胰腺星状细胞处于非激活的静止期状态，球形。当胰腺受损伤或者受到细胞生长因子等刺激后转变为激活状态。

细胞特性：

1)组织来源于实验动物的正常胰腺组织。
2)细胞鉴定：结蛋白（Desmin)或者平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免yi荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细jun、酵母和真jun。
5)细胞生长方式：多角型或星型细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

我们推荐使用 Delf 原代星状细胞培养体系作为体外培养的培养基。

产品的运输和保存：

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

注意事项：

1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时，虽然被分散成单个细胞，但它们之间的互相影响还是存在的，而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质，使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低，细胞之间的促生长作用很小，虽然营养物质很充足，也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。如果接种的细胞密度过大，会导致营养物质供应不足，代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度，给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用，会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破，分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大，在体外存活和生长的难度相应增加。对于贴壁依赖性细胞来说，尽快使接种的细胞贴壁，是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h，由于细胞悬液中带有少量培养液，细胞即可以维持存活，又可以很快接触到培养瓶底壁，是细胞迅速黏附于底物，待细胞贴壁后，再补足培养液继续培养。
3、分离细胞培养法—悬浮型细胞培养。

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