细胞介绍:
视网膜色素上皮位于脉络膜和光感受器细胞外节之间,是视网膜下腔和脉络膜血管之间的离子、水、营养物质和代谢终产物转运通道。
视网膜色素上皮参与视黄醇循环,吞噬脱落的光感受器细胞外节以维持光感受器细胞兴奋性,并分泌多种生长因子,帮助维持脉络膜血管内皮细胞和光感受器细胞的结构完整性。
包装规格:1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶
产品名称 |
猪视网膜色素上皮细胞 |
英文名称 |
Porcine retinal pigment epithelial cells |
产品规格 |
5×105 |
货号 |
P-X2286 |
公司所有产品均不得用于临床诊断,仅可用于工业或科研等非医疗目的。
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常眼组织。
我们推荐使用 DELF 原代 上皮 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
操作步骤如下:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
注意事项:
1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时,虽然被分散成单个细胞,但它们之间的互相影响还是存在的, 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质, 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低, 细胞之间的促生长作用很小, 虽然营养物质很充足, 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大,会导致营养物质供应不足, 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)细胞鉴定:细胞角蛋白-8(CK-8)免yi荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细jun、酵母和真jun。
5)细胞生长方式:上皮样,不规则细胞,贴壁培养。
1、剪切组织:先将所取得的组织,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后,用手术刀将组织切成若干小块,移入青霉素小瓶或小烧杯中,加入适量缓冲液,用弯头眼科剪,反复剪切组织,直到组织成糊状,约1mm3大小。静置片刻后,用吸管吸去上层液体,加入适当的缓冲液再清洗一次。
2、消化分离:消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞,以利于进一步的培养,常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。
3、培养:细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为(2~5)×105 cells/ml,或实验所需密度,分装于培养瓶中,使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内,5%CO2,37℃静置培养。一般3~5d,原代培养细胞可以黏附于瓶壁,并伸展开始生长,可补加原培养液量1/2的新培养液,继续培养2~3d后换液,一般7~14d可以长满瓶壁,进行传代。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度, 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用, 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破,分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大,在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说,尽快使接种的细胞贴壁,是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h,由于细胞悬液中带有少量培养液, 细胞即可以维持存活, 又可以很快接触到培养瓶底壁, 是细胞迅速黏附于底物,待细胞贴壁后,再补足培养液继续培养。
3、分离细胞培养法—悬浮型细胞培养 。
公司正在出售的产品:
人鼻腔上皮细胞RPMI 2650 (STR鉴定正确) |
兔原代脑微血管周细胞 |
phospho-ARP3 (Ser418) Antibody Blocking Peptide |
兔原代巩膜成纤维细胞 |
人原代脾脏单核细胞 |
OXT Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代肺动脉成纤维细胞 |
大鼠原代肠道干细胞 |
EDN1 Antibody Blocking Peptide |
人原代下腔静脉外膜成纤维细胞 |
人原代胰腺成纤维细胞 |
SPTBN3 Antibody Blocking Peptide |
人原代喉黏膜上皮细胞 |
小鼠原代卵泡膜细胞 |
GOLGA8H Antibody Blocking Peptide |
人原代颈静脉球瘤细胞 |
大鼠原代肾集合管上皮细胞 |
CAV1 Antibody Blocking Peptide |
绵羊原代II型肺泡上皮细胞 |
小鼠原代胰腺腺泡细胞 |
NPY4R Antibody Blocking Peptide |
兔原代鼓膜上皮干细胞 |
山羊原代卵巢颗粒细胞 |
C22orf40 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代脑血管周细胞 |
绵羊原代软骨细胞 |
CARD18 Antibody Blocking Peptide |
大鼠原代真皮毛细胞 |
大鼠原代角膜内皮细胞 |
BBS10 Antibody Blocking Peptide |
小鼠原代骨膜干细胞 |
小鼠原代脊髓神经元细胞 |
RTEL1 Antibody Blocking Peptide |
人原代增生性瘢痕成纤维细胞 |
小鼠原代结肠成纤维细胞 |
TDGF1 Antibody Blocking Peptide |
兔原代T淋ba细胞 |
人原代食管成纤维细胞 |
MC1R Antibody Blocking Peptide |
兔外周血单个核细胞(PBMC) |
小鼠原代牙周膜干细胞 |
phospho-c-Myb (Ser532) Antibody Blocking Peptide |
人原代甲状旁腺细胞 |
人原代腹膜间皮细胞 |
猪视网膜色素上皮细胞NHLH1 Antibody Blocking Peptide |