ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。下面分析Elisa试验操作中加样影响结果的原因,并给出相应的解决办法:
1、血清或血浆标本分离不好即进行加样;
2、手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);
3、加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。 解决办法:
1)、 标本为血清:*好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2)、加样后及时放入孵箱。
3)、 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
4)、 如果采用AT或其他全自动加样,*好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
5)、 标本较多时,请分批操作。