一、保存血清的办法是什么?
主张血清应保存在-5℃至-2O℃。但是,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,主张您无菌分装血清至恰当的灭jun 容器内,再放回冷冻。重复冻融会对血清的品质形成不佳影响。
二、怎么冻结血清才不会使产品质量受损?
主张您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须留意的是,溶解进程中必须规矩地摇晃均匀。
三、血清冻结后发现有絮状沉积物呈现,该怎么处理?
由于GIBCO血清在过滤之前,没有通过预老化(pre-aged)处理,所以在冻结进程(包含没有彻底冻结)或储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如凝集素、纤维蛋白原和玻连蛋白等)或许会集合成团,形成絮状沉积或外观混浊;在运输进程中,ELISA试剂盒由于时间较长,所以往往有少许冻结,因而也或许稍有沉积,但这些都不影响血清性能。
若您欲去除这些絮状沉积物,能够将血清分装至无菌离心管内,以400g略微离心,上清液即可接着加入培育基内一起过滤。咱们不主张您以过滤的办法去除这些絮状沉积物,由于它或许会阻塞过滤膜。
四、何谓热灭活?
一般是以56℃,30分钟来处理已冻结的血清,由于此加热过程,能够使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的开释,增强吞噬作用,淋ba 细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
五、有必要做热灭活吗?
试验显现,通过正确处理的热灭活xue 清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的成长只要细小的促进,或彻底没有任何作用,甚至一般由于高温处理影响了血清的质量,而形成细胞成长速率的降低。而通过热灭活的血清,沉积物的形成会明显增多,这些沉积物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉积物更增多,使研究者误认为是微生物的割裂扩增。
因而主张您,若非必须,您能够不做热灭活处理血清。这样,不仅节省您名贵的时间,更保证血清的质量。只在做免yi 学研究或培育干细胞、昆虫细胞平和滑肌细胞时,才推荐做热灭活。
六、怎么削减沉积物的发生?
主张您在使用血清的时候,留意下列的操作:
冻结血清时,请按照所主张的逐步冻结法(-20℃至4℃ 至室温),若血清冻结时改变的温度太大(如-20℃至 37℃),试验显现十分容易发生沉积物。
冻结血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,削减沉积的发生
请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因而受到危害,而影响血清的质量。
血清的热灭活十分容易形成沉积物的增多,若非必要,则毋须做此过程。若必须做血清的热灭活,请恪守56℃,30分钟的原则,而且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会形成沉积物的增多。