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细胞​技术步骤说明

细胞技术步骤说明:


1、取材


细胞株培养的材料主要来源于外科手术或活检瘤组织,取材时避免用坏死组织,要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位,瘤性转移淋ba结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养,因故不能立即培养者,可冻存。细胞株的培养方法及冻存方法同前述正常组织。


2、成纤维细胞排除


在细胞株培养中常混杂有一些成纤维细胞,培养时能与瘤细胞同时生长,并常压过癌细胞,导致癌细胞生长受阻以至消失,应仔细排除。排除方法常有:机械刮除法、反复贴壁法、消化排除法、胶原酶消化法等。


3、提高细胞培养存活率和生长率


根据实验经验,细胞株要经过对新环境的适应才能生长,因此不能局限于一般培养法,须采用一些特殊措施。如:用适宜底物,鼠尾胶原底层及饲细胞底层等。用细胞生长因子,根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子,如胰岛素、雌激su等。也可以考虑动物媒介培养。