ELISA实验加样操作要点如下:
1、因ELISA的灵敏度较高,则应该按规定将血清稀释至适当的倍数,以降低非特异性反应,使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。
2、加样品时,单孔用量要求:≥20ul/指标,如需要做2个复孔则血量≥60ul/指标。如果用量充足,提供50ul/孔/指标。具体用量也需根据试剂盒的要求而定。
3、吸取样品时,加样枪头不应粘附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,否则会导致液体残留在吸头上,加样不准确。正确加样方法应为45度,吸头贴着孔壁和液面的交界处加入。
4、加样时速度不可过快,否则无法保证微量加样的准确性和均一性;要避免样品加在孔壁上部而产生非特异性吸附。不可将样品溅出以避免对邻近孔产生污染。