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PCR出现扩增产物出现多条带问题对策

PCR出现扩增产物出现多条带问题对策:

1、引物用量偏大,引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。

2、循环的次数过多。适当增加模板的量,减少循环次数。

3、酶的用量偏高或酶的质量不好,应降低酶量或调换另一来源的酶。

4、退火温度偏低,退火及延伸时间偏长。应提高退火温度,减少变性与延伸时间,也可采用二种温度的PCR扩增。

5、样品处理不当。

6、Mg2+浓度偏高,因适当调整Mg2+使用浓度。

7、若为PCR试剂盒,也可能时试剂盒本身质量有问题。