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细胞冻存技术要点叙述

细胞冻存的基本原理:慢冻

手动降温:将细胞依序放在4℃(30分钟)、-20℃(1小时)、-80℃(过夜)后移至液氮中保存。

程序降温盒:是一般 广泛使用的降温法,为一种特制冷冻容器(填充异丙醇或依靠特制金属导热),使细胞以每分钟约-1℃的速度降至-80℃(过夜),然后移至液氮中保存。

由此可以看出,程序降温精准度更高,优于手动降温。

细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。

细胞代谢过程需要各种蛋白酶的参与,而这些蛋白酶在环境温度低于-70℃时会集体罢工,低温贮藏的目的是通过超低温使代谢活动近乎停止。细胞因此进入休眠状态,使细胞“不会老”,可以长期保存。

因为冻融过程对所有细胞和组织都是有一定伤害的,因此,需要开发出有效的技术来防止细胞死亡和损伤。