首页 >>> 公司新闻 >

公司新闻

细胞收集具体流程

细胞收集具体流程:


1、以T25瓶为例,在超净工作台中,先将培养瓶中的旧培养基轻轻吸出,用预热至 37℃的 PBS 缓冲液缓慢冲洗细胞 2 - 3 次,每次冲洗时 PBS 缓冲液的用量以能覆盖细胞单层为宜,一般为 5 - 10 ml。冲洗的目的是去除残留的培养基和血清,减少其对后续冻存过程的影响。

2、然后加入适量的胰酶-EDTA 溶液(根据细胞类型和培养瓶大小确定用量,一般 T25培养瓶加入1 ml)。

3、将培养瓶置于 37℃培养箱中消化 1 - 5 分钟。在消化过程中,需密切观察细胞形态变化。当细胞开始变圆、收缩并逐渐从培养容器底部脱离时,用手轻轻拍打培养容器的侧壁,帮助细胞完全脱落。不同细胞类型的消化时间会有所不同,例如,一些上皮细胞可能需要3-5分钟左右,而一些成纤维细胞可能需要2-4分钟左右。

4、用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞充分脱离培养瓶底部并分散均匀,避免产生过多气泡。将细胞悬液转移至15 ml离心管中。