Western Blot常用来比较不同条件下或不同细胞组织中目标蛋白表达量的相对多少，因此必须先确定上样量相同，才有比较的基础。在Western Blot实验中，可能因总蛋白浓度测定不准确，或是蛋白质上样时因操作产生误差，所以必须设置内部参照组来进行校正。此内部参照必须在不同细胞或组织间表达相对恒定，且有高水平的表达量，来确保不同样品间蛋白定量相同。而这样的参照蛋白，就称为内参，对应的抗体就称为内参抗体。内参抗体有以下三个：
1、beta Actin，肌动蛋白，细胞骨架蛋白。它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。beta Actin 作为内参是得到公认的，针对大多数组织和细胞来说的，它广泛分布于细胞质内，表达量非常丰富。但是在一些少量特殊的情况下比如脂肪组织和细胞内，beta Actin 的表达量就很少。
2、GAPDH，甘油醛-3-磷酸脱氢酶，该酶是糖酵解反应中的一个酶，几乎在所有组织细胞中都高水平表达，在同种细胞或组织中的表达量一般是恒定的，且很少受外部诱导物的影响。但比如缺氧和糖尿病等ji 病存在下，会增加 GAPDH 在特定细胞和组织中的表达。
3、beta Tubulin，微管蛋白，细胞骨架蛋白。【β-Tubulin小鼠单克隆抗体(3G6)，#A01030】 作为内参抗体，beta Tubulin 表达通常不会发生改变，因此被广泛用于 Western Blot 内参，也常被用于免yi 染色观察细胞的微管结构。