稳定转染细胞的筛选:
1、 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生su 的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,将细胞稀释至丰度不超过25%
2、每隔3-4天更换含有药wu 的筛选培养液。
3、筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4、 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药wu 的筛选培养液维持培养7天。
5、之后更换正常培养基培养即可。