操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:caspase-6活性检测试剂盒(分光光度法)
规格:20T、50T、100T
测试方法:
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
小鼠抗单核细胞抗体AMA(Mouse anti-Monocyte antibody) ELISA KIT 96T
人抗细胞球蛋白ALG(Human anti-lymphocyte globulin) ELISA Kit 96T
钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体英文名称:CaMK2 alpha 0.1ml 延伸蛋白A3(ELOA3)ELISA试剂盒 ELOA3 ELISA Kit
Ephrin A2抗体英文名称:Ephrin A2 0.1ml 酸性葡糖苷酶α(GαA)ELISA试剂盒 GαA ELISA Kit
富含丝氨酸/精氨酸重复结构蛋白抗体英文名称:FUSIP1 0.2ml 细胞抗原9(LY9)ELISA试剂盒 LY9 ELISA Kit
磷酸化组蛋白去乙酰化酶4/5/7抗体英文名称:Phospho-HDAC4 (Ser246) + HDAC5 (Ser259) + HDAC7 (Ser155) 0.1ml 肝受体同源物1(LRH1)ELISA试剂盒 LRH1 ELISA Kit
DNA损伤修复基因XRCC9抗体英文名称:FANCG 0.1ml 磷脂酶A1(PLA1)ELISA试剂盒 PLA1 ELISA Kit
锌指蛋白909抗体英文名称:ZBTB1 0.2ml
Alexa Fluor 647标记的驴抗豚鼠IgGDonkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml
PE-Cy3标记的驴抗兔IgGDonkey Anti-rabbit IgG/PE-Cy3 0.1ml
凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体LOX-1/OLR1 0.5mg
γ-谷氨酰转肽酶6抗体英文名称:GGT6 0.2ml 角蛋白3(KRT3)ELISA试剂盒 KRT3 ELISA Kit
视网膜母细胞瘤结合蛋白8抗体英文名称:CtIP 0.2ml 人抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒 TRACP-5b ELISA Kit
磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗体英文名称:Phospho-Caspase-9 (Thr125) 0.1ml 白介素33(IL-33)ELISA试剂盒 IL-33 ELISA Kit
分支酶GBE1抗体英文名称:GBE1 0.2ml 着丝粒蛋白32(CENP32)ELISA试剂盒 CENP32 ELISA Kit
DNA损伤诱导转录蛋白4抗体英文名称:DDIT4 0.1ml 停靠蛋白3(DOK3)ELISA试剂盒 DOK3 ELISA Kit
caspase-6活性检测试剂盒(分光光度法)MEM培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)盐酸氮卓斯汀(标准品) Azelastine HCl 79307-93-0 质量规格:HPLC≥98%,标准品
M199培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)阿奇霉素 Azithromycin 117772-70-0 质量规格:945-1030 ug /mg,二水物
GMEM培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)阿奇霉素(标准品) Azithromycin 117772-70-0 质量规格:效价测定
DMEM/F12培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)氨曲南 Aztreonam 78110-38-0 质量规格:> 95%,BR
McCOY’S 5A培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)氨曲南(标准品) Aztreonam 78110-38-0 质量规格:HPLC>95%,标准品
LEIBOVITZ’S L15培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)巴卡丁 III Baccatin III 27548-93-2 质量规格:纯度> 98%,BR,可用于细胞培养
ISCOVE’S MDM培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)巴卡丁 III(标准品) Baccatin III 27548-93-2 质量规格:HPLC>98%,标准品
GRACE’S 昆虫培养基 进口/国产 规格:1/10升(片剂)巴氯芬 Baclofen 1134-47-0 质量规格:纯度>99,USP
胚胎干细胞(ES)基础培养基 进口/国产 规格:500毫升巴氯芬(标准品) Baclofen 1134-47-0 质量规格:HPLC>98%,标准品
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)完全培养基 进口/国产 规格:500毫升巴洛沙星(标准品) Balofloxacin Dihydrate 151060-21-8 质量规格:> 98%,水合物标准品
胚胎干细胞培养生长因子 进口/国产 规格:5/10/50毫升巴洛沙星 Balofloxacin Dihydrate 151060-21-8 质量规格:纯度> 98.5%,BR,二水合物
胚胎干细胞基质胶溶液 进口/国产 规格:10毫升盐酸苯达莫司汀 Bendamustine HCl 3543-75-7 质量规格:纯度> 98%
胚胎干细胞补充培养基 进口/国产 规格:100毫升盐酸苯达莫司汀(标准品) Bendamustine HCl 3543-75-7 质量规格:HPLC>98%,标准品
人体胚胎干细胞条件培养基 进口/国产 规格:100毫升倍他米松 Betamethasone 378-44-9 质量规格:>98%
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