miRNA荧光定量qPCR检测

操作步骤(仅供参考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：  
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：miRNA荧光定量qPCR检测
规格：125次
测试方法：
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
G氨基丁酸B型受体2抗体英文名称：GABA B Receptor 2 0.1ml  谷氨酸脱氢酶(GDH)ELISA试剂盒  GDH ELISA Kit

上皮细胞特异性蛋白1抗体英文名称：NES/KLK10 0.1ml  K-乙酰转移酶5(KAT5)ELISA试剂盒  KAT5 ELISA Kit

狂躁基因同源蛋白MFNG抗体英文名���：Manic Fringe 0.2ml  Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒  PⅡNT ELISA Kit

神经肽S抗体英文名称：Neuropeptide S 0.2ml  

RecQ解旋酶样蛋白5抗体英文名称：RECQL5 0.2ml  

Ras样蛋白家族10A抗体英文名称：RASL10A 0.2ml  

磷酸化微管相关蛋白抗体英文名称：phospho-Tau protein(Thr529) 0.1ml  

CD2F-10抗体英文名称：SLAMF9 0.2ml  

罗丹明标记的小鼠抗牛IgGMouse Anti-Bov IgG/RBITC 0.1ml  

CD97抗体英文名称：CD97 0.1ml  棕榈酰化膜蛋白5(MPP5)ELISA试剂盒  MPP5 ELISA Kit

表皮生长因子受体3(抗原)ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 0.5mg  

兔血管**素2ANG-2 (Rabbit Angiopoietin 2) ELISA Kit 96T  

人膀胱肿瘤抗原BTA(Human Bladder tumor antigen) ELISA Kit 96T  

大鼠雌二醇E2 ELISA Kit 96T  

人血小板膜糖蛋白ⅣGP- IV (Human platelet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit 96T  

磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗体英文名称：phospho-GEF H1 (Ser886) 0.1ml  热休克蛋白27(HSP27)ELISA试剂盒  HSP27 ELISA Kit

miRNA荧光定量qPCR检测糖化血清白蛋白（GSP）酶连续反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次辛硫磷(分析标准品,99%) Phoxim 14816-18-3 质量规格：分析标准品,99%

糖血清蛋白（GSP）化学比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：50次除草醚标准溶液(10μg/ml,u=5%) Nitrofen solution 1836-75-5 质量规格：10μg/ml,u=5%

糖血清蛋白（GSP）酶连续反应比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次2-萘氧乙酸(标准品) 2-Naphthoxyacetic acid 120-23-0 质量规格：分析标准品

总L-高半胱氨酸（Hcy）定量检测试剂盒 进口/国产 规格：50次灭丹标准溶液(100μg/ml,u=2%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 133-07-3 质量规格：100μg/ml,u=2%

通用型高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次灭丹标准溶液(10μg/ml,u=6%) N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution 133-07-3 质量规格：10μg/ml,u=6%

细胞高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次恶草酮(分析标准品,97.5%) Oxadiazon 19666-30-9 质量规格：分析标准品,97.5%

组织高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次甲基嘧啶磷(10μg/ml,u=3%) Pirimiphos-methyl solution 29232-93-7 质量规格：10μg/ml,u=3%

体液高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次扑灭津(标准品) Propazine 139-40-2 质量规格：分析标准品

细胞培养液高密度脂蛋白胆固醇（HDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次戊炔草胺(标准品) Propyzamide 23950-58-5 质量规格：分析标准品

通用型低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次腐霉利(标准品) Procymidon 32809-16-8 质量规格：分析标准品

细胞低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次吡蚜酮(标准品) Pymetrozin 123312-89-0 质量规格：分析标准品

组织低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次敌稗(分析标准品,98%) Propanil 709-98-8 质量规格：分析标准品,98%

体液低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次抑霉唑标准溶液(10μg/ml,u=2%) Imazalil solution 35554-44-0 质量规格：10μg/ml,u=2%

细胞培养液低密度脂蛋白胆固醇（LDL-Cholesterol）酶连续循环比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格：20次稻瘟灵标准溶液(10μg/ml,u=2%) Isoprothiolane solution 50512-35-1 质量规格：10μg/ml,u=2%

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