操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:葡萄糖脱氢酶
规格:10KU/瓶
测试方法:
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
血管内皮细胞粘附分子抗原VCAM-1/CD106 (Vascuolar cell adhesion molecule 1) 0.5mg
防御素α6抗体英文名称:Defensin alpha 6 0.2ml 细胞色素P450家族成员2E1(CYP2E1)ELISA试剂盒 CYP2E1 ELISA Kit
脂肪酸去饱和酶1抗体英文���称:FADS1 0.2ml 嘌呤能受体P2X7(P2RX7)ELISA试剂盒 P2RX7 ELISA Kit
氨基葡萄糖6-硫酸酯酶抗体英文名称:GNS 0.2ml 肌球蛋白轻链9(MYL9)ELISA试剂盒 MYL9 ELISA Kit
卤酸脱卤酶样水解酶域内含蛋白1A抗体英文名称:HDHD1A 0.2ml 蛋白L-异天冬氨酸-O-甲基转移酶(PCMT1)ELISA试剂盒 PCMT1 ELISA Kit
组蛋白H3K9甲基转移酶4抗体英文名称:SETDB1 0.2ml Intersectin2蛋白(ITSN2)ELISA试剂盒 ITSN2 ELISA Kit
神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体英文名称:MDGA2 0.2ml
蛋白激酶样内质网激酶抗体英文名称:PERK 0.1ml
G蛋白P21 RAC2抗体英文名称:RAC2 0.2ml
PE-Cy5.5标记的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy5.5 0.1ml
锌指蛋白BED抗体英文名称:ZBED2 0.2ml
Alexa Fluor 488标记的驴抗人IgGDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 0.1ml
丝裂原活化蛋白激酶4抗原MAPK4(Mitogen-activated protein kinase 4) 0.5mg
多药耐药相关蛋白5抗原MRP5/ABCC5(Multidrug Resistanec-Associated Protein 5) 0.5mg
γ-衔接蛋白相关蛋白1抗体英文名称:GGA1 0.2ml 角化蛋白(CNFN)ELISA试剂盒 CNFN ELISA Kit
小鼠可溶性CD30配体sCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit 96T
葡萄糖脱氢酶血清脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感(DTNB)比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次D-精氨酸 D-Arginine 157-06-2 质量规格:0.98
组织脊髓过氧化酶(MPO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次非对称二甲基精氨酸 ADMA 220805-22-1 质量规格:>98%,盐酸盐形式,美国进口
组织脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次N'-硝基-D-精氨酸 N'-Nitro-D-arginine 66036-77-9 质量规格:0.98
组织脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感(DTNB)比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次D-天冬酰胺,一水 D-Asparagine monohydrate 5794-24-1 质量规格:0.99
植物脊髓过氧化酶(MPO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次D-天冬氨酸 D-Aspartic acid 1783-96-6 质量规格:0.98
植物脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次D-天冬氨酸4-叔丁酯 D-Aspartic acid 4-tert-butyl ester 64960-75-4 质量规格:0.98
植物脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感(DTNB)比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次D-谷氨酸 D-Glutamic acid 6893-26-1 质量规格:0.98
细胞(NO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次TLCK(进分) Nα-Tosyl-L-lysine chloromethyl ketone HCl 4272-74-6 质量规格:进分,sigma T7254
组织(NO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次甘氨酰-L-酪氨酸;甘洛二肽 Glycyl-L-tyrosine 658-79-7 质量规格:>98%,BR,水合物
血液(NO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次D-亮氨酸 D-Leucine 328-38-1 质量规格:>98%,BR
体液(NO)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次D-赖氨酸盐酸盐 H-D-Lys-OH·HCl 7274-88-6 质量规格:>99%,BR
细胞(NO)活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次D-蛋氨酸 D-Methionine 348-67-4 质量规格:>98%,BR
组织(NO)活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次索非布韦 Sofosbuvir (GS-7977) 1190307-88-0 质量规格:>99%,BR
血液(NO)活性荧光定量检测试剂盒 进口/国产 规格:50次D-鸟氨酸盐酸盐 D-Ornithine monohydrochloride 16682-12-5 质量规格:>98%,BR
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