操作步骤(仅供参考):
1.配制65mM H2O2基液:本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定,使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍,使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品:
a,细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行裂解,可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液,如果有必要需进行适当匀浆,低速离心取上清,-70℃冻存,用于CAT的检测。
b,血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备,用生理盐水10倍稀释后, 可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,-70℃冻存,用于CAT的检测。
c,全血样品:收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内,颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次,用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min,弃上清,沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。
e,高活性样品:如果样品中含有较高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。
3、 CAT检测:按照下表设置空白管、自身对照管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度,分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计,亦可用酶标仪检测,但如果有条件,尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零,读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:PLC-γ2 (phospho-Tyr1217) Antibody
规格:详见说明
测试方法:详见说明
客户自备仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点:
1、优化设计的实验方案,1小时即可完成
2、灵敏度高,操作便捷
3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂
常见样本处理方法:
1、血清(浆)样品:直接检测。
2、组织:按照组织质量(g) :提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,
加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 (果糖含量测试盒说明书过过滤)。
4 ). 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加彻底。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
Alexa Fluor 350标记的驴抗人IgGDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 350 0.1ml
肿瘤坏死因子-β抗原TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta) 0.5mg
罗丹明标记牛血清白蛋白BSA/RBITC 0.3ml
小鼠CD8分子CD8(Rat Troponin T) ELISA Kit 96T
人αL岩藻糖苷酶AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 96T
碳水化合物磺基转移酶14抗体英文名称:CHST14 0.1ml 信号传导转录激活因子1(STAT1)ELISA试剂盒 STAT1 ELISA Kit
唐氏综合征细胞粘附分子抗体英文名称:Dscam 0.2ml 通用转录因子ⅡE肽1(GTF2E1)ELISA试剂盒 GTF2E1 ELISA Kit
范可尼贫血相关蛋白M抗体英文名称:FANCM 0.2ml 膜联蛋白A4(ANXA4)ELISA试剂盒 ANXA4 ELISA Kit
桥尾蛋白抗体英文名称:Gephyrin 0.1ml 骨形成蛋白1(BMP1)ELISA试剂盒 BMP1 ELISA Kit
人鞭毛蛋白Human flagellin ELISA Kit 96T
湿疹血小板减少伴 缺陷综合征相关蛋白抗体英文名称:WASP 0.1ml
兔抗鸡IgMRabbit Anti-chicken IgM 0.2ml
胶体金标记的兔抗小鼠IgMRabbit Anti-mouse IgM/Gold 0.5ml
肝脏型脂肪酸结合蛋白抗原LFABP/FABP-1(Liver Fatty acid binding protein) 0.5mg
酰基辅酶A脱氢酶长链抗体英文名称:ACADL 0.1ml 心钠肽(ANP)ELISA试剂盒 ANP ELISA Kit
锌指蛋白851抗体英文名称:BTBD15 0.2ml 可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)ELISA试剂盒 sLOX-1 ELISA Kit
PLC-γ2 (phospho-Tyr1217) Antibody胰蛋白大豆肉汤 用于菌落计数以及培养苛养和非苛养菌500g Winogradskyella ulvae 冻干粉
GVPC琼脂基础 100(g) Winogradskyella thalassocola 冻干粉
EC Broth EC肉汤 1.10765.0502MERCK默克 Winogradskyella eximia 冻干粉
沙保氏麦芽糖琼脂 (CM0041a) Oxoid Winogradskyella eckloniae 冻干粉
蔗糖胰蛋白胨肉汤 250(g) Winogradskyella echinorum 冻干粉
煌绿肉汤增菌液基础 250(g) Winogradskyella damuponensis 冻干粉
DNA酶甲基绿琼脂基础 100(g) Gillisia mitskevichiae 冻干粉
半固体动力培养基 250(g) Aurantimonas litoralis 冻干粉
胆盐乳糖发酵培养基 250(g) 缓症链球菌 冻干粉
液体沙氏培养基 250(g) 珊瑚球菌 冻干粉
氯化镁孔雀绿肉汤(MM/RV/R10) 250(g) 彭氏变形杆菌 冻干粉
MUELLER-HINTON agar MUELLER-HINTON 琼脂 1.05437.0500MERCK默克 肺炎克雷伯氏菌鼻硬结亚种 冻干粉
弗雷泽李斯特菌选择富集肉汤(基础) 新鞘脂菌属 冻干粉
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