c-Cbl (phospho-Tyr700) Antibody

操作步骤(仅供参考)：  
1.配制65mM H2O2基液：本试剂盒提供的H2O2基液中的H2O2浓度约为1M。由于过 氧化氢不是非常稳定，使用前需自行测定过氧化氢的实际浓度。把浓度约为1M的H2O2基液用本试剂盒提供的CAT Assay buffer稀释100倍，使H2O2基液中的H2O2浓度约为10mM。
2.准备样品：  
a,细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行裂解，可以采用Leagene Western及IP 细胞裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
b,血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，用生理盐水10倍稀释后， 可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-70℃冻存，用于CAT的检测。  
c,全血样品：收集适量的全血(whole blood)至一抗凝管内，颠倒混匀。取100μl全 血冻融一次，用CAT Assay buffer1000倍后进行CAT检测。
d,血液中的红细胞裂解液：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。取至少500μl全血4℃ 3000g离心5min，弃上清，沉淀用预冷的生理盐水洗涤3次。  
e,高活性样品：如果样品中含有较高活性的CAT，可以使用CAT Assay buffer稀释。
f,(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的CAT含量。  
3、 CAT检测：按照下表设置空白管、自身对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并 注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测能设置平行孔。
4、分光光度计检测405nm处吸光度，分光光度计比色杯光径0.5cm。如果没有分光光度计，亦可用酶标仪检测，但如果有条件，尽量采用分光光度计检测。蒸馏水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：c-Cbl (phospho-Tyr700) Antibody
规格：详见说明
测试方法：详见说明
客户自备仪器和试剂：
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
特点：
       1、优化设计的实验方案，1小时即可完成
       2、灵敏度高，操作便捷
       3、试剂盒提供检测果糖所需的全套试剂 
常见样本处理方法：
1、血清（浆）样品：直接检测。
2、组织：按照组织质量（g） ：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g组织，
加入 1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

样品制备：
1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。
2）. 过滤混浊溶液。
3）. 除去样品中的CO 2 （果糖含量测试盒说明书过过滤）。
4 ）. 果糖含量测试盒说明书过加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。
6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10）.含脂肪的样品用热水提取。
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。
钙粘蛋白相关蛋白受体BTR1抗体英文名称：BTR1 0.1ml  前列腺特异性抗原(PSA)ELISA试剂盒  PSA ELISA Kit

多巴胺D1受体相互作用蛋白抗体英文名称：Calcyon 0.2ml  巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒  MIP-1α/CCL3 ELISA Kit

2号染色体开放阅读框3抗体英文名称：C2orf3  0.2ml  γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒  IFN-γ ELISA Kit

二氢嘧啶酶相关蛋白1抗体英文名称：CRMP1 0.1ml  原钙黏素γA2(PCDHγA2)ELISA试剂盒  PCDHγA2 ELISA Kit

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体GM-CSF Ab(Human anti-Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor antibody) ELISA Kit 96T  

促性腺素释放  受体2抗体英文名称：GNRHR2 0.1ml  回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)ELISA试剂盒  FABP6 ELISA Kit

绿色荧光蛋白抗体英文名称：GFP 0.2ml  高尔基体蛋白A2(GOLGA2)ELISA试剂盒  GOLGA2 ELISA Kit

白介素3抗体英文名称：IL-3 0.2ml  氨甲基转移酶(AMT)ELISA试剂盒  AMT ELISA Kit

细胞周期调节蛋白P95抗体英文名称：p95 NBS1 0.2ml  70kDa热休克蛋白4(HSPA4)ELISA试剂盒  HSPA4 ELISA Kit

胎盘生长因子抗体英文名称：PLGF 0.1ml  

磷酸化抑制基因P53抗体英文名称：phospho-P53(Ser392) 0.1ml  

磷酸化原癌基因c-Raf抗体英文名称：phospho-c-Raf(Ser338) 0.1ml  

瞬时受体电位离子通道蛋白4抗体（M亚家族）英文名称：TRPM4 0.2ml  

甘蔗SCYLV抗体英文名称：SCYLV 0.2ml  

CD80抗体英文名称：CD80 0.2ml  白介素12受体(IL-12R)ELISA试剂盒  IL-12R ELISA Kit

早老素蛋白-1（S182）PS-1，Presennillin-1(CT) 0.5mg  

c-Cbl (phospho-Tyr700) Antibody庆大霉素（10mg/ml）

Gentamicin    推荐浓度：0.5-50ug/ml

保存15-30°15710-064 脱叶链霉菌 冻干粉

Columbia Agar     链霉菌 冻干粉

Sodium-chloride peptone broth(buffered) 氯化钠蛋白胨肉汤（缓冲）    1.10582.0500MERCK默克 Lentzea sp 冻干粉

Dextrose casein-peptone agar 葡萄糖酪蛋白琼脂    1.10860.0500MERCK默克 利迪链霉菌 冻干粉

肉汤琼脂培养基    250(g) 热紫链霉菌 冻干粉

嗜盐性试验培养基    250(g) 橘橙指孢囊菌 冻干粉

肠球菌肉汤    250(g) 吸水链霉菌吸水亚种 冻干粉

Mcaso broth with novobiocin( Mtsb+N) m乙醇白酶大豆肉汤（含新生霉素）    1.09205.0500MERCK默克 白色链霉菌白色亚种 冻干粉

***检定培养基6号    250(g) 热紫链霉菌热紫亚种 冻干粉

弯曲菌无血选择琼脂基础 (CM0739)    Oxoid　 紫红链霉菌 冻干粉

DPBS，（10X），（IVD）    含钙镁离子，不含酚红14080-055 大孢链霉菌 冻干粉

Phosphate Buffer, pH 7.2     巨孢链霉菌 冻干粉

MRS agar Lactobacillus broth acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS    1.10661.0500MERCK默克 棘孢小单胞菌 冻干粉

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